Invitrogen™ Alexa Fluor™ 405 NHS Ester (succinimidylester)

Alexa Fluor™ 405 är ett blåfluorescerande färgämne som är optimalt för användning med 405 nm violett laser. Används för stabil signalgenerering inom bildbehandling och flödescytometri, Alexa Fluor™ 405 färgämne är vattenlösligt och pH-okänsligt från pH 4 till pH 10. Förutom reaktiva färgämnen erbjuder vi Alexa Fluor™ 405-färgämne konjugerat till en mängd olika antikroppar, peptider, proteiner, spårämnen och amplifieringssubstrat optimerade för cellulär märkning och detektion.

NHS-estern (eller succinimidylestern) av Alexa Fluor™ 405 är det mest populära verktyget för att konjugera detta färgämne till ett protein eller en antikropp. NHS-estrar kan användas för att märka primära aminerna (R- _NH2 ) av proteiner, aminmodifierade oligonukleotider och andra amininnehållande molekyler. Det resulterande Alexa Fluor™ konjugat kommer att uppvisa ljusare fluorescens och större fotostabilitet än konjugaten av andra spektralt liknande fluoroforer.

Detaljerad information om detta AlexaFluor™ NHS ester:
Fluoroforetikett: Alexa Fluor™ 405 färgämnes
reaktiv grupp: NHS
esterreaktivitet: Primära aminer på proteiner och ligander, aminmodifierade
oligonukleotider Ex/Em av konjugatet: 400/424
nm Extinktionskoefficient: 35 000 cm ^-1 M ^-1
Spektralt liknande färgämnen:Pacific Blue
Molekylvikt: 1028,3

Typisk konjugeringsreaktion Du kan
konjugera aminreaktiva reagenser med praktiskt taget vilket protein eller vilken peptid som helst (det medföljande protokollet är optimerat för IgG-antikroppar). Du kan anpassa reaktionen till valfri mängd protein, men proteinkoncentrationen bör vara minst 2 mg/mL för bästa resultat. Vi rekommenderar att du provar tre olika grader av märkning, med tre olika molförhållanden mellan det reaktiva reagenset och proteinet.

De Alexa Fluor™ NHS-ester löses vanligtvis i högkvalitativ vattenfri dimetylformamid (DMF) eller dimetylsulfoxid (DMSO) (D12345), och reaktionen utförs i 0,1 –0,2 M natriumbikarbonatbuffert, pH 8,3, vid rumstemperatur under 1 timme. Eftersom pKa för den terminala aminen är lägre än den för lysinepsilon-aminogruppen, kan du uppnå mer selektiv märkning av aminterminalen med en buffert närmare neutralt pH.

Konjugatrening Märkta
antikroppar separeras vanligtvis från fria Alexa Fluor™ färg med hjälp av en gelfiltreringskolonn, såsom Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 eller motsvarande. För mycket större eller mindre proteiner, välj ett gelfiltreringsmedium med en lämplig molekylviktsgräns eller rena genom dialys. Vi erbjuder flera reningssatser optimerade för olika mängder antikroppskonjugat:
Antikroppskonjugatreningskit för 0,5-1 mg (kat.nr. A33086)
Antikroppskonjugatreningskit för 20-50μ g (Kat. nr. A33087)
Antikroppskonjugatreningskit för 50-100μ g (Kat. nr. A33088)

Lär dig mer om protein- och antikroppsmärkning Vi
erbjuder ett brett urval av Molecular Probes™ antikropps- och proteinmärkningssatser för att passa ditt startmaterial och din experimentuppställning. Se våra antikroppsmärkningssatser eller använd vårt Labeling Chemistry Selection Tool för andra val. För att lära dig mer om våra märkningssatser, läs Kit för märkning av proteiner —och nukleinsyror avsnitt 1.2 i Molecular Probes™ Handbok.

Vi ’kommer att göra ett anpassat konjugat åt dig
Om ’du inte kan hitta ’det du letar efter i vår onlinekatalog, kommer vi ’att förbereda en anpassad antikropp eller proteinkonjugat åt dig. Vår tjänst för anpassad konjugering är effektiv och konfidentiell, och vi står för kvaliteten på vårt arbete. Det är vi ISO 13485:2000 certifierad.