Invitrogen™ Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ Utrustning

Liksom andra medlemmar i Cells-to-CT™ produktfamiljen, den Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ Kit gör det möjligt att utföra expressionsanalys direkt från odlade celler utan RNA-rening.

Detta nya tillskott till familjen inkluderar en TaqMan™ 1-Step RT-PCR-mastermix. Enkelrörsformatet i RT-PCR-steget effektiviserar arbetsflödet ''prov för att svara'' mer än någonsin. Kombinera de enkla cellerna-till- CT™ lyseringsteknik med den snabba cyklingsförmågan hos 1-stegs RT-PCR-mastermixen ger snabbare tid till resultat med begränsad provhantering.

De Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ Kit är:

• Komplett —optimerat arbetsflöde inkluderar cellysreagenser med gDNA-borttagning och TaqMan™ 1-Step RT-PCR Master Mix
• Snabbare än —någonsin 7-minuters provförberedelse, inklusive DNase-behandling, kombinerat med ett 28-minuters RT-PCR-steg i realtid möjliggör∼ 35 minuters arbetsflöde från exempel-till-svar
• Enkla —10 steg totalt (provprep och realtids RT-PCR kombinerat)
• Robust —utföra genuttrycksanalys på 10 100 000 –celler per prov; resultat ekvivalenta med de från renat RNA
• Convenient —innehåller tillräckligt med reagens för att utföra 5 realtids RT-PCR för varje cellprov du förbereder; detta låter dig studera flera mål eller utföra replikat RT-PCR

Notera: TaqMan™ primer/probset säljs separat.

Enkel 7-minuters provberedning, sedan redo för RT-PCR i realtid

Oavsett om du använder plattor eller rör, Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ Kit använder en enkel 7-minuters provberedningsprocedur. Lystekniken är designad för 10 100 000 –odlade celler/prov. Celler tvättas i PBS och lyseras i lösning under 5 minuter vid rumstemperatur med en samtidig DNas-behandling. Lyseringen avslutas vid rumstemperatur genom en 2-minuters inkubation med stopplösning. Lysatet är nu redo att analyseras på ditt realtids-PCR-instrument. Lägg bara till den i en realtids-RT-PCR-mastermix som innehåller TaqMan™ primer/probuppsättningar av intresse. Alternativt kan lysatet förvaras vid– 20 °C. Eftersom prover kan bearbetas direkt i odlingsbrunnar (96 eller 384 brunnar) minimeras provhanteringen och risken för provförlust eller överföringsfel, vilket underlättar snabb bearbetning med hög genomströmning. Till skillnad från gammaldags RNA-isoleringsprotokoll i flera steg krävs inga steg för uppvärmning, tvättning eller centrifugering. Satsen förenklar avsevärt en mödosam 30 –60 minuters process och minskar den till 7 minuter.

En komplett, validerad lösning

Alla komponenter i Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ Satsen har optimerats för konsekvent och pålitlig prestanda. Detta tar bort gissningarna som är involverade i att montera separata provberedning och realtids 1-stegs RT-PCR-mastermixar. För ytterligare kvalitetssäkring, Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ Kit har validerats med TaqMan™ Genuttryck analyserar och visar prestanda motsvarande den som erhålls med renat RNA.

Tillbehörsprodukt

De TaqMan™ Cells-to-CT™ Kontrollsats (kat. nr. 4386995) har utformats för användning med TaqMan™ Cells-to-CT™ produkter. Detta kit innehåller en endogen kontroll (ACTB) för att normalisera för provladdningsvariabilitet och en artificiell XenoRNA™ kontroll och motsvarande TaqMan™ Genuttrycksanalys för att övervaka effekterna av PCR-hämning.