Invitrogen™ Ambion™ DNas I (RNas-fri)

DNas I fungerar genom att hydrolysera fosfodiesterbindningar, producera mono- och oligonukleotider med 5'-fosfat- och 3'-hydroxylgrupp. RNas-fritt DNas I rekommenderas för att bryta ned DNA i närvaro av RNA, i frånvaro av RNas är avgörande för att upprätthålla integriteten hos RNA. Till exempel används DNas I ofta för att avlägsna mall-DNA efter in vitro-transkription och för att avlägsna kontaminerande DNA i totala RNA-beredningar (särskilt de från transfekterade celler som kan innehålla plasmid-DNA), som används för ribonukleasskyddsanalyser, cDNA-bibliotekskontraktion och RT-PCR.

• Testad för kontaminerande RNas- och proteasaktivitet
• Funktionalitet bestäms genom nedbrytning av humant genomiskt DNA följt av kvantitativ realtids-PCR för att detektera osmält DNA
• Kräver tvåvärda katjoner (Mg ²⁺ och Ca ²⁺ vid cirka 5 mM respektive 0,5 mM) för maximal aktivitet och har ett pH-optimum på 7,8
• Enhetsdefinition: En enhet är mängden enzym som krävs för att fullständigt bryta μned 1 g DNA på 10 minuter. vid °37 C, och motsvarar 0,04 Kunitz-enheter

För ett alternativ till bovint DNas I, överväg rekombinant DNas I (fabrikant nr AM2235). För ett mer aktivt, salttolerant DNas, se TURBO™ DNase-produkter (fabrikant nr AM2239 och AM2238).

PCR& Realtids-PCR, Realtids-PCR (qPCR), omvänd transkription