Invitrogen™ Dynabeads™ Oligo(dT) ₂₅

Dynabeads™ Oligo(dT) ₂₅ mRNA-isoleringspärlor riktar sig specifikt mot och fångar upp mRNA-molekyler från praktiskt taget vilket råprov som helst och eliminerar behovet av att rena totalt RNA när den önskade informationsbärande nukleinsyran är mRNA. Eftersom mRNA endast omfattar cirka –1 5 % av totalt cellulärt RNA, är isolering av totalt RNA inte det mest effektiva sättet att isolera mRNA. Andra teknologier utformade för att rena totalt RNA-utbyte∼ 80 % ribosomalt RNA och tvingar mRNA att konkurrera med ribosomalt RNA, överför RNA, mikro-RNA, litet nukleolärt RNA och litet cytoplasmatiskt RNA för membranbindning. Fördelar med Dynabeads™ Oligo(dT) ₂₅ pärlor:

• Snabb och skonsam procedur ger rent intakt mRNA
• Extremt ren mRNA-isolering, bästa valet uppströms om cDNA-syntes
• Utsökt känslig mRNA-isolering möjliggör cDNA-syntes och cDNA-bibliotekskonstruktion från ultrasmå startprover (möjliggör cDNA-bibliotekskonstruktion från en enda cell)

Hur pärlorna fungerar Den
oligo(dT) ₂₅ -belagda Dynabeads™ specifikt rikta in och fånga upp mRNA-transkriptomet från ett extremt brett utbud av råa startprover. Ribosomalt RNA, DNA, proteiner och små RNA-molekyler (som överförings-RNA, mikro-RNA och små nukleolära RNA) binder inte till pärlorna och kasseras. Endast polyadenylerade RNA-arter (mRNA) fångas in. Isolerat mRNA är rent, vilket eliminerar behovet av ribosomalt RNA-subtraktion eller en DNas-behandling efter extraktion. Detta kolumnfria system säkerställer högsta transkriptomåtervinning:

• Fysisk mRNA-infångning på mobila magnetiska pärlor
• Snabba och skonsamma magnetiska hanteringsprocedurer
• Inget mRNA förlorat under hög g-kraft spins
• Inget mRNA fångat i kolonnmembran under

eluering Tillämpningar
mRNA är lämpligt för alla nedströms molekylära tillämpningar, inklusive genkloning, cDNA-syntes, cDNA-bibliotekskonstruktion, RT-PCR, kvantitativ RT-PCR, RPA (Ribonuclease Protection Assay), subtraktiv hybridisering, primerförlängning, SAGE , RACE och andra. De Dynabeads™ Oligo(dT) ₂₅ mRNA-isoleringskulor är den ideala mRNA-reningsmetoden före cDNA-bibliotekskonstruktion. Användning av dessa pärlor säkerställer den högsta återhämtningen och anrikningen av transkriptomet. Dessa pärlor fångar mer av transkriptomet än vad som är möjligt med metoder som integrerar ett totalt RNA-isoleringssteg uppströms om mRNA-isolering.

Mångsidiga elueringsalternativ
Eluering kan utföras i valfri volym ner till 5μ L. mRNA-eluering är valfri eftersom enzymatiska reaktioner i nedströmsprocedurer inte hämmas av närvaron av Dynabeads™ . Dessutom kan man utföra cDNA-syntes direkt på pärlorna för att skapa ett återanvändbart cDNA-bibliotek i fast fas.