Invitrogen™ Snabb SYBR™ Green Cells-to-C _T™ Kit

Ambion Fast SYBRGreen Cells-to-C _T™ Kit är en snabb, enkel och robust metod för att gå direkt från odlade celler till realtids PCR-resultat. En banbrytande celllys och RNA-stabiliseringsteknologi eliminerar den mödosamma och tidskrävande RNA-reningen helt. Satsen innehåller tillräckligt med reagens för 100 reaktioner. Fast SYBRGreen Cells-to-C _T Kit innehåller AmpliTaq™ Fast DNA Polymerase, UP, som möjliggör omedelbar varmstart, vilket minimerar ospecifik produktbildning med snabb realtids-PCR.

• Inkluderar optimerade reagenser för att arbeta effektivt direkt ur lådan
• Enkel, effektiv Cells-to-C _T -teknik möjliggör provberedning vid rumstemperatur på bara 7 minuter, inklusive DNase-behandling
• Validerad noggrannhet, exceptionell reproducerbarhet och maximal känslighet från 10 till 100 000 celler per prov; resultat ekvivalenta med de från renat RNA
• 2-stegs QRT-PCR

Extraordinärt värde
Kitet innehåller reagenser för provberedning integrerade i ett komplett, optimerat genuttrycksarbetsflöde inklusive reagenser för omvänd transkription och en högpresterande PCR-mastermix med SYBRGreen.

Enastående lätthet
Protokollet börjar med en enkel 7-minuters provberedningsprocedur. Först tvättas cellerna i PBS och lyseras sedan under 5 minuter vid rumstemperatur; Dnasbehandling kan utföras samtidigt. Lysreaktionen stoppas och provet är sedan redo för omvänd transkription eller lagring vid -20 C °i upp till 5 månader. Eftersom prover bearbetas direkt i odlingsplattor (96- eller 384-brunnar) minimeras provhanteringen och risken för provförlust eller överföringsfel, vilket resulterar i högre reproducerbarhet. Efter provberedning tillsätts en del av cellysatet till en RT-reaktion följt av realtids-PCR med den medföljande mastermixen.

Extraordinär prestation
För att demonstrera satsens prestanda kördes replikatexperiment med antingen traditionell RNA-rening och realtids-PCR-analys eller Fast SYBRGreen Cells-to-C _T Kit. Kitet visar motsvarande prestanda som resultat som erhållits med renat RNA för analys av 10 till 100 000 celler. Dessutom visades känsligheten, effektiviteten och dynamiska omfånget vara överlägsen konkurrerande lysatkit. Prover förberedda med kitet har testats för kompatibilitet på olika realtids-PCR-plattformar inklusive de från Applied Biosystems , Roche , och Bio-Rad .

Tillbehörsprodukt:
SYBRGreen Cells-to-C _T Control Kit (kat. nr. 4402959) innehåller en Xeno™ RNA-kontroll och primeruppsättning och rekommenderas för att övervaka effektiviteten av cellys och amplifieringshämning i celler-till- _CT- reaktioner.