Läs mer
Invitrogen™ FirstChoice™ RLM-RACE Kit
Beskrivning
Innehåller
Exo– Klenow, 10X Decamer Solution, 5X Reaction Buffer minus dATP, 5X Reaction Buffer minus dCTP, DECAtemplate GAPDH-M, and 0.5M EDTA should be stored at –20°C. Nuclease-free water may be stored at any temperature.
Kräver
SuperTaq TermostabilTaq DNA-polymeras säljs separat. För optimal amplifiering av fragment≥ 1 kb, använd SuperTaq-Plus.
FastAP™ Termosensitiv alkalisk fosfatas, 10X FastAP buffert, tobakssyrapyrofosfatas, 10x TAP-buffert, T4 RNA-ligas, 10x T4 RNA-ligasbuffert, M-MLV omvänd, Transcriptase RNashämmare, 10X RT-buffert, 2,5 mM dNTP-blandning, musthymus-RNA (1 mg/ml), slumpmässiga decamers, 5' RACE-adapter, 3' RACE-adapter, 5' RACE yttre primer, 5' RACE inre primer, 3' RACE yttre primer, 3' RACE yttre primer, 3' RACE Inner Primer, 5' RACE Exterior Control Primer, 5' RACE Inner Control Primer, 5' PCR Control Primer, 3' RACE Control Primer och Ammonium Acetat Stop Solution bör förvaras vid -20 °C. Nukleasfritt vatten kan lagras vid vilken temperatur som helst.
FirstChoice™ RLM-RACE-kitet är utformat för att amplifiera cDNA från fulllängds, capped mRNA genom RNA Ligase Mediated Rapid Amplification of cDNA Ends (RLM-RACE). Kitet säkerställer amplifiering av endast fulllängdstranskript genom att eliminera ribosomalt RNA, fragmenterat mRNA, tRNA och kontaminerande genomiskt DNA under amplifikationsprocessen. Detta kit är en stor förbättring jämfört med det grundläggande RACE-protokollet (rapid amplification of cDNA ends).
Notera: kalv-intestinal fosfatas (CIP) hade ersatts med FastAP Thermosensitive Alkaline Phosphatase Adjusted Protocol, vilket eliminerar behovet av fenol/kloroformextraktion och etanolfällning. Om det väljs kan fenol/kloroform-steget användas med uppdaterat kit efter verifiering av reaktionsvolymer.
Funktioner i RLM-RACE-kitet FirstChoice inkluderar:
- Väljer 5' och/eller 3' ändar av fulllängds, capped mRNA
- Optimerad för att säkerställa detektion även av sällsynta mRNA, vilket ger specifik produkt
- Gör det möjligt att slutföra experimentet på mindre än en dag
Selekterar fulllängds mRNA—utan rRNA, tRNA eller nedbrutet mRNA
I FirstChoice RLM-RACE-proceduren väljs fulllängds mRNA genom att behandla total- eller poly(A)-RNA med FastAP termosensitiv alkalisk fosfatas för att avlägsna 5'-fosfatet från alla molekyler som innehåller fria 5'-fosfater (ribosomalt RNA, fragmenterat mRNA, tRNA och kontaminerande genomiskt DNA). Fulllängds mRNA påverkas inte. RNA:t behandlas sedan med tobakssyrapyrofosfatas (TAP) för att avlägsna kapselstrukturen från det fulllängds mRNA:t, vilket lämnar en 5'-monofosfat. En syntetisk RNA-adapter är ligerad till RNA-populationen—, endast molekyler som innehåller en 5'-fosfat, de obegränsade, fulllängds mRNA:na, accepterar adaptern. Slumpmässigt primade, omvända transkriptionsreaktioner och nästlad PCR utförs sedan för att förstärka 5'-änden av ditt specifika transkript.
Från RNA till PCR på mindre än en dag
Varje steg i FirstChoice RLM-RACE-proceduren har optimerats, så att du kan slutföra alla enzymatiska reaktioner och till och med påbörja PCR på högst 5 timmar. RLM-RACE-kitet FirstChoice innehåller reagenser och enzymer för att producera 6 RLM-RACE-klara cDNA-preparat, primers och nästlade RACE-adapterprimers för 100 PCR-reaktioner. Kitet inkluderar omvänd transkriptionsreagenser och 3' RACE-adapter samt primers för 3' RACE. Varje kit innehåller kontroll-RNA och primers för att testa kitets prestanda, protokoll beskrivet i användarhandboken med Platinum™ hjälp av II Hot-Start PCR Master Mix.
Beställningsinfo
Fraktsätt: Torr is
Specifikationer
Specifikationer
| Produkttyp | RLM-RACE Kit |
| Inkluderar | Kit med manuell, FastAP™ termosensitiv alkalisk fosfatas, 10X FastAP buffert, tobakssyrapyrofosfatas, 10X TAP-buffert, T4 RNA-ligas, 10X T4 RNA-ligasbuffert, M-MLV omvänd Transcriptase, RNasehämmare, 10X RT-buffert, 2,5 mM dNTP-blandning, musthymus-RNA (1 mg/ml), slumpmässiga dekamrar, 5' RACE-adapter, 3' RACE-adapter, 5' RACE yttre primer, 5' RACE inre primer, 3' RACE yttre primer, 3' RACE innerprimer, 5' RACE yttre kontrollprimer, 5' RACE innerkontrollprimer, 5' PCR Control primer, 3' RACE Control primer och ammoniumacetatstopplösning, nukleasfritt vatten |
| Innehåll och lagring | •FastAP™ Termosensitiv alkalisk fosfatas |
| Slutlig produkttyp | cDNA |
| Optimal reaktionstemperatur | 42 °C |
| Omvänt transkriptas | M-MLV |
| Formatera | Kit |
| Produktlinje | Ambion, FirstChoice |
| För användning med (applikation) | cDNA-bibliotek & Bibliotekskonstruktion |
| Kvantitet | 1 Kit med manuell |
Endast för forskning. Ej för diagnostik.
Genom att klicka på Skicka bekräftar du att du kan bli kontaktad av Fisher Scientific angående feedbacken du har lämnat i detta formulär. Vi kommer inte att dela din information för andra ändamål. All kontaktinformation som tillhandahålls ska också underhållas i enlighet med vår Sekretesspolicy.