Invitrogen™ Ambion™In vivo faktor VII positiv kontroll siRNA

Ambion™In vivo siRNA-kontroller

• Validerade siRNA-kontroller för att optimera siRNA-experiment inriktade på kodande och icke-kodande transkript
• Positiv kontroll siRNA funktionellt testade i flera vanliga cellinjer
• Negativa kontroller har funktionellt bevisats ha minimala effekter på cellproliferation och livsduglighet
• Omfatta Silencer™ Välj modifieringar för förbättrad specificitet eller Ambion™ In Vivo-modifieringar för ökad stabilitet
• För användning i musceller

Vad är Ambion™ In vivo siRNA?

Ambion™In Vivo siRNA är designade med den beprövade ljuddämparen™ Välj algoritm och införliva kemiska modifieringar för överlägsen serumstabilitet med in vivo-tillförsel. Den extra serumstabiliteten äventyrar inte siRNA:s prestanda. Ambion™In vivo siRNA har visat sig vara icke-toxiska in vivo (mus) och icke-immunogena (cellbaserade analyser). I cellbaserade analyser, Ambion™In Vivo uppvisar siRNA:er motsvarande eller bättre styrka än Silencer™ Välj siRNA. Resultatet är bättre förtroende för dina in vivo RNAi-experiment, bättre knockdown när det paras ihop med en effektiv leveranslösning och försäkran om begränsade ospecifika effekter.

Faktor VII (FVII) Positiv kontroll siRNA

Ambion™In Vivo Faktor VII siRNA, In Vivo Ready, ger en positiv kontroll för experiment som involverar Ambion™In vivo siRNA-leverans till möss. Faktor VII (FVII/F7; även känd som prokonvertin) är ett vitamin K-beroende serinproteas som fungerar som ett centralt protein i koagulationskaskaden. FVII syntetiseras i levern och utsöndras till plasmat där det cirkulerar i en inaktiv form. Efter leverans av FVII-inriktat siRNA till levern kan knockdown mätas genom att kvantifiera FVII-proteinnivåer i blod med robusta, kommersiellt tillgängliga kromogena analyser. Dessutom kan blodprover tas från samma djur vid flera tidpunkter efter siRNA-injektion. Dessa funktioner möjliggör mycket snabbare och effektivare knockdown-mätningar för FVII än för genmål som kräver kvantifiering av mRNA-nivåer i levervävnad, vilket gör FVII till en idealisk kontroll för in vivo siRNA-leverans.

Kvalitetskontroll

Ambion™ syntetiserar och renar var och en Ambion™In Vivo siRNA i toppmoderna anläggningar för att möta högsta kvalitetsstandarder. Som en del av våra rigorösa kvalitetskontrollförfaranden analyseras varje RNA-oligonukleotid med MALDI-TOF-masspektrometri, och analytisk HPLC används för att övervaka renheten. För att ge högsta möjliga kvalitet utvärderar vi också varje glödgat siRNA genom gelelektrofores för att bekräfta att strängarna härdar ordentligt. Resultatet är siRNA av högsta kvalitet som är renat och redo att användas.

In Vivo-färdiga kontroller

Våra ''In Vivo Ready'' kontroll siRNAs utsätts för den extra nivån av rening och testning som krävs för införande av siRNA i djur. Efter HPLC-rening och hybridisering renas varje siRNA ytterligare med hjälp av en process som tar bort överskott av salt via ett semipermeabelt membran. Resultatet är mycket rent siRNA med minimalt saltinnehåll, lämpligt för in vivo-applikationer. In vivo siRNA sterilfiltreras sedan och testas för närvaron av endotoxin. Vid koncentrationer av 50μ M i närvaro av avjoniserat vatten, in vivo Ready siRNA innehåller mindre än 5,0 mM Na ⁺ , mindre än 0,06 mM K ⁺ och mindre än 0,02 mM Mg2 ⁺ .