Invitrogen™ RNA senare -™ICE Frozen Tissue Transition Solution

RNAlater-ICE är ett nytt reagens för att överföra frusen vävnad till ett tillstånd som lätt kan bearbetas för extraktion av högkvalitativt RNA. Frysta vävnader nedsänks helt enkelt i RNAlater-ICE och får tina över natten vid -20 °C. När de är upptinade kan vävnaderna bearbetas som färska vävnader med standardförfaranden för RNA-isolering. Ingen mer mödosam malning av frusen vävnad för att skydda RNA.

•Bearbeta tidigare frysta vävnader som nyskördade prover
• Tining av vävnader i RNAlater-ICE skyddar RNA från nedbrytning
• Ingen mer vävnadspulvrisering med mortel och mortelstöt och besvärlig överföring av pulver till tuben
• Fördela enkelt frusna vävnadsprover för flera experiment
• Snabbfrysning av vävnader

bevarar RNA Ofta är vävnader som måste lagras innan RNA-isolering“ knäppa” eller“ flash” fryst på torris eller i flytande kväve för att bevara RNA-integriteten. RNA i vävnad är stabilt när det fryses vid -°80 C, men upptining av vävnaden före eller under dess avbrott kan resultera i RNA-nedbrytning. Detta gäller även om vävnaden tinar medan den är i denatureringslösningen.

Bearbetning av frysta vävnader är problematisk
Frysta vävnader mals vanligtvis med en kyld mortel och mortelstöt för att bibehålla RNA-kvaliteten. Flytande kväve måste tillsättas till morteln för att hålla provet fruset medan det mals. För flera prover är denna process mödosam. Antingen behövs en separat mortel och mortelstöt för varje prov, eller så måste setet tinas och rengöras efter att varje prov har bearbetats för att undvika korskontaminering. Pulveriserad vävnad kan också tina under överföring till ett homogeniseringskärl. Detta resulterar ofta i bildning av klumpar som inte lätt sprids i lyslösningen, vilket resulterar i RNA-nedbrytning och förlust. Mycket små prover bör homogeniseras omedelbart i lyslösning, vilket återigen kan vara besvärligt om det finns flera prover att bearbeta.

Bearbeta fryst vävnad utan att äventyra RNA-integriteten
RNAlater-ICE löser alla dessa problem. Sänk helt enkelt frysta vävnadsprover i 10 volymer RNAlater-ICE och förvara över natten °vid -20 C (lösningen förblir flytande vid dessa temperaturer). När vävnaden tinar skyddas RNA-integriteten. När den väl har behandlats kan vävnaden förvaras °säkert vid 4 C eller till och med vid rumstemperatur (under en begränsad tidsperiod) och kan vidare dissekeras eller bearbetas före homogenisering i en standard RNA-isoleringslysbuffert. Således kan samma frusna vävnadsprov användas flera gånger för olika experiment utan att kompromissa med RNA-integriteten.