Invitrogen™ RNA senare™ stabiliseringslösning

RNAlater RNA-stabiliseringslösning stabiliserar och skyddar cellulärt RNA i intakta, ofrysta vävnadsprover, vilket eliminerar behovet av att omedelbart bearbeta vävnadsprover eller frysa prover i flytande kväve för senare bearbetning. Vävnadsbitar kan skördas och nedsänkas i RNAlater RNA-stabiliseringslösning för lagring utan att äventyra kvaliteten eller kvantiteten av RNA som erhålls efter efterföljande RNA-isolering. Fördelar med att använda RNA later RNA-stabiliseringslösning:

• Effektivitet —stabiliserar RNA i 1 dag vid 37°C, 1 vecka vid 25°C, 1 månad vid 4°C, eller obestämd tid vid -20°C
• Enkelhet —ett enda reagens som omedelbart inaktiverar RNaser och stabiliserar RNA i vävnader eller celler
• Bekvämt —inget behov av att frysa prover i flytande kväve eller skynda prover tillbaka till labbfrysen
• Rörlighet —perfekt för vävnadsinsamling på fältet
• Mångsidighet —kompatibel med många RNA-isoleringsprocedurer, inklusive de flesta RNA-isoleringssatser

Tillämpningar
RNAlater RNA-stabiliseringslösning har testats på en mängd olika däggdjursvävnader, växter, E. coli, Xenopus, fiskar och Drosophila. Idealisk för:

• Skyddar RNA-integritet i vävnader rika på RNaser
• Samla in prover från olika tidpunkter utan att behöva bearbeta proverna från varje tidpunkt omedelbart
• Arkivering av vävnader för framtida mikrodissektion
• Nedsänkning av håligheter eller organ från djur för att stabilisera RNA under långa dissektionsprocedurer
• Samla prover på platser (t.ex. sjukhus, fältplatser, rymdfärjan) där omedelbar RNA-isolering inte är möjlig
• Skicka prover på våt is eller till och med vid rumstemperatur om de skickas över natten

RNAlater RNA-stabiliseringslösningsprocedur
Den dissekerade vävnaden (mindre än 0,5 cm i en dimension) nedsänks helt enkelt i cirka 5 volymer RNAlater -lösning vid rumstemperatur. Lösningen tränger igenom cellerna och stabiliserar RNA:t. Provet kan sedan förvaras på obestämd tid vid -20°C (vävnaden fryser inte), vid 4°C i upp till en månad eller vid 25°C i upp till en vecka. För RNA-isolering avlägsnas vävnaden helt enkelt från RNA later -lösning och behandlas som om den precis hade skördats. De flesta vävnader kan överföras direkt till en lysbuffert och homogeniseras. Prover behandlade med RNAlater -lösning och sedan frysta kan malas med mortel och mortelstöt eller tinas och bearbetas som färsk vävnad utan oro för cellruptur och frisättning av RNaser eftersom RNaserna redan har inaktiverats. Celler kan snurras ut och sedan läggas till lysbuffert, eller i vissa fall kan RNA later -lösning tillsättas tillsammans med cellerna direkt till lysbufferten.

Kompatibel med en mängd olika procedurer
RNA later RNA-stabiliseringslösning är kompatibel med enstegs-RNA-isoleringsmetoder, såsom TRIzol-reagens; med glasbindningsmetoder såsom Qiagens RNeasy eller Ambion RNAqueous kit; med sura fenolextraktionsmetoder såsom Ambion TOTALLY RNA-kit; och med metoder som använder oligo(dT)-selektion av mRNA, såsom Ambion Poly(A)Purist™kit. Intern forskning, liksom nyligen publicerad oberoende forskning, indikerar att användningen av RNAlater RNA-stabiliseringslösning för vävnadslagring inte påverkar resultatet av efterföljande RNA-expressionsanalysexperiment jämfört med andra bearbetningsmetoder.