Invitrogen™ Ambion™ RNas-hämmare, klonad, 40 U/μ L

Ambion RNas Inhibitor, ett rekombinant humant protein som produceras i E. coli , är en potent hämmare av neutrala enzymer av RNas A-typ i pankreas. Inhiberingssättet är icke-konkurrenskraftigt; hämmaren binder tätt till RNaser i ett förhållande på 1:1. Enzymet har visat sig inaktivera RNaser som finns i många vävnader och celltyper. Tillsats av ribonukleasinhibitorn (RI) har visat sig vara användbar närhelst integriteten av RNA måste upprätthållas, såsom vid framställning av cDNA genom omvänd transkription, in vitro RNA-transkription och in vitro proteinsyntes. RI hämmar inte RNas I, T1, T2, H, U1, U2 eller CL3. RI kräver minst 1 mM DTT för att bibehålla aktiviteten och har ett aktivitetsområde mellan pH 5,0 till 8,0 med maximal aktivitet mellan pH 7,0 och 8,0. Eftersom hämningssättet är bildningen av ett 1:1-komplex med RNaser, måste försiktighet iakttas för att undvika denaturering eller oxidation av ribonukleasinhibitorn (t.ex. genom tillsats av SDS, urea, etc.). RI bör läggas till transkriptions-, translations- och cDNA-syntesreaktioner för att ge en slutlig koncentration på 1U/μ L. RNase Inhibitor är noggrant testad för kontaminering av RNas-, exonukleas-, endonukleas- och proteasaktivitet.
Enhetsdefinition: En enhet är mängden protein som krävs för att hämma aktiviteten av 5 ng RNas A med 50 %. Enhetsanalysförhållanden: 100 mM Tris-acetat (pH 6,5), 1 mM EDTA, 1 mM cyklisk 2 ft., 3 ft.-CMP och RNas-inhibitor. Tillsats av RNas A initierar reaktionen. RNas-inhibitoraktivitet mäts genom hämning av hydrolys av cyklisk 2 ft., 3 ft.-CMP av RNase A.

Användningsområden:

Genuttrycksanalys och genotypning, in vitro-transkription, PCR och realtids-PCR, realtids-PCR (qPCR), omvänd transkription