Läs mer
Invitrogen™ BLOCK-iT™ Inducerbar Pol II miR RNAi Expression Vector Kit med EmGFP
Beskrivning
De BLOCK-iT™ Pol II miR RNAi Expression Vector Kits kombinerar fördelarna med traditionella RNAi-vektorer (stabilt uttryck och förmågan att använda virustillförsel) med kapacitet för vävnadsspecifikt uttryck och multipla mål knockdown från samma transkript. De BLOCK-iT™ Pol II miR RNAi Expression Vector Kits och BLOCK-iT™ Lentivirala Pol II miR RNAi-expressionssystem är designade för att uttrycka artificiella miRNA som är konstruerade för att ha 100 % homologi med din målsekvens och kommer att resultera i målklyvning. Använder Invitrogen's prisbelönt BLOCK-iT™ RNAi Designer, över 70% av konstruktionerna producerar mer än 70% knockdown.
De Invitrogen Pol II uttrycksfamilj av vektorer inkluderar:
- Starkt uttryck från CMVs omedelbara tidiga promotor, med möjlighet att använda vävnadsspecifika eller andra reglerade promotorer via MultiSite Gateway™ rekombination.
- Kompatibilitet med många av Invitrogen's Gateway™ destinationsvektorer (DEST) för genuttryck.
- Förmåga att kontrollera initieringen av RNAi-svaret med en ny BLOCK-iT™ Inducerbar Pol II miR RNAi Expression Vector Kit med EmGFP.
- En ny destinationsvektor i BLOCK-iT™HiPerform™ Lentiviralt PolII miR RNAi uttryckssystem med EmGFP. Den nya vektorn innehåller en mRNA-stabiliserande sekvens (WPRE) och en nukleär importsekvens (cPPT) som genererar upp till 5 gånger högre virustitrar och EmGFP-expressionsnivåer. Dessutom uttrycks blasticidinresistens från mus-Pgk-1-promotorn för att undvika avstängning efter flera passager.
- Samcistroniskt uttryck av Emerald GFP (EmGFP), vilket resulterar i korrelation av EmGFP-uttryck med knockdown från din miR RNAi.
- Uttryck av mer än en konstruerad miR RNAi-sekvens på samma transkript, vilket möjliggör knockdown av flera gener samtidigt och generering av syntetiska fenotyper
Den nya BLOCK-iT™ Inducerbar Pol II miR RNAi Expression Vector Kit med EmGFP ger möjligheten att reglera RNAi-experiment. Detta kit innehåller pT-REx-DEST30 Gateway™ vektor som efter enkla klonings- och skytteltekniker producerar en miR RNAi-expressionsvektor som är lämplig för inducerbar knockdown. pT-REx-DEST30 Gateway™ vektorn innehåller CMV-promotom med två kopior av tetracyklinoperatorsekvensen (tetO2) som tillåter högnivå och reglerad expression. Detta tillåter studiet av förlust av funktion i en stabilt transfekterad cellinje även om genen av intresse är väsentlig. Dessutom kan induktion av miR RNAi-uttryck stoppas så att fenotypiska förändringar kan mätas under återhämtning av genfunktion.
För en mängd olika uttrycksalternativ kan miR RNAi-kassetten, som innehåller EmGFP (endast ™pcDNA 6.2-GW/EmGFP-miR-vektor), miR-flankerande regioner och en miRNA som är homolog med målet av intresse, lätt flyttas till en mängd olika DEST-vektorer. Detta sker genom Gateway™ rekombinationsreaktioner där miR RNAi-kassetten överförs till en pDONR™ vektor (BP-reaktion) och sedan in i en valfri DEST-vektor (LR-reaktion). De HiPerform™ Systemet har den nya destinationsvektorn pLenti6.4/RF R2/V5-DEST för höga virustiter och EmGFP-uttryck.
Specifikationer
Specifikationer
| Produkttyp | RNAi Expression Vector Kit |
| Beskrivning | BLOCK-iT™ Inducible Pol II miR RNAi Expression Vector Kit with EmGFP, 20rxns, Liquid, CMV/TO Promorter, Transfection Delivery Method, Gateway™ Cloning Method, BLOCK-iT RNAi Vectors Type, Inducible System, GFP (EmGFP) Reporter, |
| För användning med (applikation) | RNAi, epigenetics and non-coding RNA research, vector-based RNAi |
| Inkluderar | The BLOCK-iTTM Inducible PolII miR RNAi Expression Vector Kit w/EmGFP contains a cloning box with linearized pcDNA™6.2-GW/EmGFP-miR, 10X annealing buffer, T4 DNA Ligase, 5X DNA Ligation buffer, lacZ control oligo, lacZ control plasmid, negative control plasmid, DNase/RNase-free water, and forward and reverse sequencing primers. This kit also contains the pT-REx-DEST30 Gateway™ Vector kit (includes pT-REx-DEST30 and pT-REx/GW-30/lacZ vectors), and the T-RExTM Regulatory Module (includes pcDNA™6/TR and Tetracycline). The Gateway™ LR and BP Clonase™ kits, blasticidin, and pDONRTM221 are included. Store the vectors, buffers, control oligo and plasmids, antibiotics, clonase kits, water, and sequencing primers at –20°C. The One Shot™ box contains transformation reagents including twenty-one 50-μl aliquots of One Shot™ TOP10 Chemically Competent E. coli, S.O.C. medium, and a pUC19 supercoiled control plasmid |
| Antal reaktioner | 20 |
| Vektor | BLOCK-iT RNAi vektorer |
| Formatera | Kit |
| Gen | GFP (EmGFP) |
| Innehåll och lagring | BLOCK-iT™ Inducerbar PolII miR RNAi Expression Vector Kit w/EmGFP En kloningsbox med: • Linjäriserad ™pcDNA 6.2-GW/EmGFP-miR • Glödgningsbuffert (10X) • T4 DNA-ligas • DNA-ligeringsbuffert (5X) •lacZ -kontrolloligo •lacZ kontrollplasmid • Negativ kontrollplasmid • DNas/RNasfritt vatten • Framåt- och bakåtsekvenseringsprimers pT -REx-DEST30 Vektor Gateway™ Kit pT -•REx-DEST30 •pT-REx/GW-30/lacZ -T-REx™ vektorer •Reglerande ™modul •pcDNA 6/ Gateway™ TR Tetracyklin The Clonase™ LR och BP pDONR™ kit, blasticidin och 221 ingår också. Förvara vektorerna, buffertarna, kontrolloligo och plasmider, antibiotika, klonas-kit, vatten och sekvenseringsprimrar vid -20 °C. Den ena Shot™ lådan innehåller transformationsreagens inklusive tjugoen 50-μ L alikvoter av One Shot™ TOP10 Kemiskt kompetent E. coli , SOC-medium och en pUC19 supercoiled kontrollplasmid. Förvara dessa transformationsreagenser -80 °C. |
| Kloningsmetod | Gateway™ |
| Visa mer |
Endast för forskning. Ej för diagnostik.
Din input är viktig för oss. Fyll i det här formuläret för att ge feedback relaterad till innehållet på denna produkt.