Läs mer
Invitrogen™ BLOCK-iT™ Inducerbar Pol II miR RNAi Expression Vector Kit med EmGFP
Beskrivning
BLOCK-iT™ Pol II miR RNAi Expression Vector Kits kombinerar fördelarna med traditionella RNAi-vektorer (stabilt uttryck och förmågan att använda viral leverans) med möjligheter till vävnadsspecifikt uttryck och multipla målnedslagning från samma transkript. BLOCK-iT™ Pol II miR RNAi Expression Vector Kits och BLOCK-iT™ Lentiviral Pol II miR RNAi Expression Systems är utformade för att uttrycka artificiella miRNA som är konstruerade för att ha 100 % homologi till din målsekvens och kommer att resultera i målklyvning. Med hjälp av Invitrogen's den prisbelönta BLOCK-iT™ RNAi Designer producerar över 70 % av konstruktionerna mer än 70 % knockdown.
Invitrogen Pol II-uttrycksfamiljen av vektorer inkluderar:
- Starkt uttryck från CMV omedelbar tidig promotor, med möjlighet att använda vävnadsspecifika eller andra reglerade promotorer via MultiSite-rekombination Gateway™ .
- Kompatibilitet med många av Invitrogen's Gateway™ destinationsvektorerna (DEST) för genuttryck.
- Förmåga att kontrollera initieringen av RNAi-responsen med ett nytt BLOCK-iT™ inducerbart Pol II miR RNAi Expression Vector Kit med EmGFP.
- En ny destinationsvektor i Lentiviral BLOCK-iT™ HiPerform™ PolII miR RNAi Expression System med EmGFP. Den nya vektorn innehåller en mRNA-stabiliserande sekvens (WPRE) och en nukleär importsekvens (cPPT) som genererar upp till fem gånger högre virustiters och EmGFP-uttrycksnivåer. Dessutom uttrycks blasticidinresistens från musens Pgk-1-promotor för att undvika avstängning efter flera passager.
- Kocistronisk uttryck av Emerald GFP (EmGFP), vilket resulterar i korrelation mellan EmGFP-uttryck och knockdown från ditt miR RNAi.
- Uttryck av mer än en konstruerad miR RNAi-sekvens på samma transkript, vilket möjliggör nedslagning av flera gener samtidigt och generering av syntetiska fenotyper
Det nya BLOCK-iT™ Inducible Pol II miR RNAi Expression Vector Kit med EmGFP ger möjlighet att reglera RNAi-experiment. Detta kit innehåller pT-REx-DEST30-vektorn Gateway™ som, efter enkla klonings- och shuttlingtekniker, producerar en miR RNAi-uttrycksvektor lämplig för inducerbar knockdown. pT-REx-DEST30-vektorn Gateway™ innehåller CMV-promotorn med två kopior av tetracyklinoperatorn (tetO2)-sekvensen, vilket möjliggör högnivå- och reglerad expression. Detta möjliggör studier av funktionsförlust i en stabilt transfekterad cellinje även om genen av intresse är avgörande. Dessutom kan induktion av miR-RNAi-uttryck stoppas så att fenotypiska förändringar kan mätas under återhämtningen av genfunktionen.
För olika uttrycksalternativ kan miR RNAi-kassetten, som innehåller EmGFP (pcDNA™6.2-GW/EmGFP-miR endast vektor), miR-flankområden och ett miRNA homolog med det intresserade målet, enkelt flyttas till olika DEST-vektorer. Detta sker genom Gateway™ rekombinationsreaktioner där miR RNAi-kassetten överförs till en pDONR™ vektor (BP-reaktion) och sedan till en DEST-vektor (LR-reaktion) av eget val. Systemet HiPerform™ har den nya pLenti6.4/RF R2/V5-DEST destinationsvektorn för höga virustitrar och EmGFP-uttryck.
Specifikationer
Specifikationer
| Produkttyp | RNAi Expression Vector Kit |
| Beskrivning | BLOCK-iT™ Inducible Pol II miR RNAi Expression Vector Kit with EmGFP, 20rxns, Liquid, CMV/TO Promorter, Transfection Delivery Method, Gateway™ Cloning Method, BLOCK-iT RNAi Vectors Type, Inducible System, GFP (EmGFP) Reporter, |
| För användning med (applikation) | RNAi, epigenetics and non-coding RNA research, vector-based RNAi |
| Antal reaktioner | 20 |
| Vektor | BLOCK-iT RNAi vektorer |
| Formatera | Kit |
| Gen | GFP (EmGFP) |
| Innehåll och lagring | BLOCK-iT™ Inducerbar PolII miR RNAi Expression Vector Kit w/EmGFP En kloningsbox med: • Linjäriserad ™pcDNA 6.2-GW/EmGFP-miR • Glödgningsbuffert (10X) • T4 DNA-ligas • DNA-ligeringsbuffert (5X) •lacZ -kontrolloligo •lacZ kontrollplasmid • Negativ kontrollplasmid • DNas/RNasfritt vatten • Framåt- och bakåtsekvenseringsprimers pT -REx-DEST30 Vektor Gateway™ Kit pT -•REx-DEST30 •pT-REx/GW-30/lacZ -T-REx™ vektorer •Reglerande ™modul •pcDNA 6/ Gateway™ TR Tetracyklin The Clonase™ LR och BP pDONR™ kit, blasticidin och 221 ingår också. Förvara vektorerna, buffertarna, kontrolloligo och plasmider, antibiotika, klonas-kit, vatten och sekvenseringsprimrar vid -20 °C. Den ena Shot™ lådan innehåller transformationsreagens inklusive tjugoen 50-μ L alikvoter av One Shot™ TOP10 Kemiskt kompetent E. coli , SOC-medium och en pUC19 supercoiled kontrollplasmid. Förvara dessa transformationsreagenser -80 °C. |
| Kloningsmetod | Gateway™ |
| Konstitutivt eller inducerbart system | Inducerbar |
| Visa mer |
Endast för forskning. Ej för diagnostik.
Genom att klicka på Skicka bekräftar du att du kan bli kontaktad av Fisher Scientific angående feedbacken du har lämnat i detta formulär. Vi kommer inte att dela din information för andra ändamål. All kontaktinformation som tillhandahålls ska också underhållas i enlighet med vår Sekretesspolicy.