Thermo Scientific™ CellSensor™ ISRE- bla Jurkat Cell Line

De CellSensor™ ISRE-bla Jurkat-cellinjen innehåller en beta-laktamasreportergen under kontroll av det interferon-stimulerade svarselementet (ISRE) stabilt integrerat i Jurkat-celler. För att konstruera denna cellinje omvandlades ISRE-bla-konstruktionen till Jurkat-celler med lentivirus. Flödescytometri användes för att isolera celler som reagerar på IFNα . Denna cellinje validerades för DMSO-tolerans, cellantal, stimuleringstid, substratladdningstid samt ' och EC50-koncentrationer av IFNα . De CellSensor™ ISRE-bla Jurkat-cellinjen svarar på Interferon alfa (IFN-alfa) och Interferon beta och kan användas för att undersöka de typ I-interferoninducerade JAK-STAT-signalvägarna. Denna cellinje kan anpassas för screening med hög genomströmning av agonist- eller antagonistföreningsbibliotek. Läkemedelskandidater kan också testas för dosrespons mot denna cellinje. ISRE-bla Jurkat-celler behandlades med agonist IFN-alfa; över det angivna koncentrationsintervallet i ett format med 384 brunnar. Celler inkuberades i 5 timmar med agonist och 0,5 % DMSO och kombinerades sedan med LiveBLAzer™ -FRET B/G-substrat (CCF4-AM) i 2 timmar. Fluorescensemissionsvärden vid 460 nm och 530 nm erhölls med användning av en standard fluorescensplattläsare, och förhållandena 460/530 plottades mot koncentrationen av agonisten. Akademiska och ideella kunder, vänligen fråga efter specialpriser.