Invitrogen™ CorrectASE™ Enzym

CorrectASE™ enzym tar bort felparningar orsakade av oligonukeotidsyntesfel, vilket leder till en 3 –10-faldig minskning av mutationer i dina syntetiska gener eller fragment.

Genom att introducera CorrectASE™ enzym i ditt gör-det-själv-gensyntesarbetsflöde kan du:

• Minska antalet mutationer i din syntetiska gen eller fragment
• Minska din arbetstid genom att screena endast 2 –4 kloner istället för 10-16 kloner per syntetisk konstruktion
• Minska dina kostnader genom att sekvensera endast –2 4 kloner istället för 10 –16 syntetiska gener

Förhindra oönskade mutationer

Kommersiellt tillgängliga syntetiska oligonuceotider har en hög felfrekvens under syntes, allt från en per 300 –1000 baser, beroende på källan. Dessa fel orsakar ramförskjutning (deletion och infogning) och felmatchningsmutationer under gensyntes. Inkubation med CorrectASE™ enzym tar bort båda typerna av mutationer.

Inkubationssteget med CorrectASE™ enzymet introduceras efter den initiala PCR-sammansättningen av oligonukleotider. PCR-produkten denatureras och återannealeras så att eventuella mutationer kommer att vara omatchade. CorrectASE™ enzym binder till de resulterande felmatchningarna och hackar båda DNA-strängarna 3' om felet. 3' till 5' exonukleasaktiviteten hos enzymet tar bort felen. En slutlig PCR med ett korrekturläsande polymeras sätter sedan ihop de korrigerade fragmenten, vilket ökar sannolikheten för att isolera kloner med rätt sekvens. Beroende på den inkommande oligonukeotidkvaliteten behöver –endast 2 4 kloner screenas, jämfört med –10 16 kloner i ett arbetsflöde som inte inkluderar korrigeringssteget. Inklusive CorrectASE™ enzym i ditt arbetsflöde för gensyntes minskar arbetstiden och sekvenseringskostnaderna.