Invitrogen™ eBioscience™ Annexin V Apoptosdetektionskit

Annexiner är en familj av kalciumberoende fosfolipidbindande proteiner som företrädesvis binder fosfatidylserin (PS). Under normala fysiologiska förhållanden är PS övervägande lokaliserat i plasmamembranets inre broschyr. Vid initiering av apoptos förlorar PS sin asymmetriska fördelning över fosfolipiddubbelskiktet och translokeras till det extracellulära membranbroschyret som markerar celler som mål för fagocytos. Väl på den yttre ytan av membranet kan PS detekteras med fluorescensmärkt annexin V på ett kalciumberoende sätt.

I tidigt stadium av apoptos utesluter plasmamembranet viabilitetsfärgämnen som propidiumjodid (PI), 7-AAD eller fixerbara viabilitetsfärgämnen som t.ex. eFluor 450. Dessa celler kommer att färgas med annexin V men inte ett viabilitetsfärgämne, vilket särskiljer celler i tidig apoptos. Men i sent skede av apoptos förlorar cellmembranet integritet, vilket gör att annexin V också kan komma åt PS i det inre av cellen. Ett livskraftsfärgämne kan användas för att lösa dessa apoptotiska och nekrotiska celler i det sena stadiet (annexin V, viabilitetsfärgämne-positivt) från de apoptotiska cellerna i det tidiga stadiet (annexin V-positiv, viabilitetsfärgämnesnegativ).

Aktuella livskraftsfläckar tillgängliga med eBioscience Annexin V Apoptosdetektionskit inkluderar FITC, eFluor 450, allofykocyanin (APC), fykoerytrin (PE), PE-cyanin7 och biotin.