Applied Biosystems™ ExoSAP-IT™ Express PCR Product Cleanup

Nyckelfunktioner i ExoSAP-IT™Express reagens:

• 5 minuters protokoll —Snabbaste handläggningstid till resultat
• En-rör, ettstegs PCR-rensning Lägg —till ExoSAP-ITExpress direkt till PCR-produkt
• Ny enzymteknologi —inaktiveras irreversibelt på bara en minut vid 80 °C
• Bevara PCR-prover —till 100 % återvinning av PCR-produkter, oavsett amplikonlängd
• Eliminera spinnkolonner eller pärlor Minskar —avsevärt tid och fel samtidigt som utbytet ökar
• Kompatibel —Inga störningar i nedströmsapplikationer
• Skalbar —Behandla ett brett spektrum av volymer
• Flera format —Enkelrörs-, 8-rörsremsor och 96-brunnars plattformat erbjuder flexibilitet från manuell pipettering till automatiserade arbetsflöden
• Bli grön —Generera mindre avfall med en enkelrörslösning för PCR-rensning

Översikt

Det är nödvändigt att avlägsna överskott av primrar och oinkorporerade nukleotider från PCR-reaktionen före sekvensering.

En enzymatisk rengöringsmetod erbjuder precision och hastighet över tekniker som spinnkolonner eller pärlor. ExoSAP-ITExpress -reagens består av två hydrolytiska enzymer, en modifierad Exonuclease I och Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP ), i en speciellt formulerad buffert. Det används för att ta bort överskott av primers och dNTP från en PCR-blandning utan störningar i nedströmsapplikationer. Denna unika, mycket stabila lösning med ett rör ger större självförtroende och överlägsna sekvenseringsresultat (Fig. 1).

Innovativ lösning

Våra forskare konstruerade Exonukleas I för att ha ökad värmelabilitet, vilket möjliggör inaktivering på bara 1 minut (Fig. 2). ExoSAP-ITExpress -reagens tillsätts direkt till PCR-produkten för en 4 minuters rengöring vid 37 C, °följt av en 1 minuts inaktivering vid 80 °C, vilket ger exakta och konsekventa resultat på bara 5 minuter.

Snabbaste PCR-rensningsmetoden

Denna nya teknik möjliggör en betydande minskning av provrensningstiden med minimala steg, vilket ger det enklaste arbetsflödet (Fig. 3). ExoSAP-ITExpress -reagens erbjuder snabba handläggningstider och förbättrad effektivitet av resurser samtidigt som den levererar den kvalitet som forskarna har vant sig vid när de använder ExoSAP-IT för PCR-produktrensning.

Bevara PCR-prover— enkelt ett steg, 100% återhämtning

De ExoSAP-ITExpress enzymatisk rengöringsmetod är utformad för att minimera fel genom att reducera ditt protokoll till ett enda pipettsteg, vilket möjliggör automatiserad eller manuell bearbetning från ett enda rör eller mikrotiterbrunn. ExoSAP-ITExpress -reagens överträffar konkurrenterna genom att säkerställa 100 % återvinning av alla amplikonstorlekar, både korta och långa (tabell 1).

ExoSAP-ITExpress PCR Product Cleanup är aktiv i vanliga PCR-buffertar, så inget buffertbyte krävs. Efter behandling, ExoSAP-ITExpress -reagens inaktiveras genom upphettning vid 80 C °i 1 minut. De behandlade PCR-produkterna är sedan redo för efterföljande analys i applikationer som kräver att DNA är fritt från överskott av primers och nukleotider.