Läs mer
Thermo Scientific™ FastAP Värmekänsligt alkaliskt fosfatas (1 U/μ L)
Handla allt Thermo Scientific ProdukterBeskrivning
FastAP Värmekänsligt alkaliskt fosfatas katalyserar frisättningen av 5'- och 3'-fosfatgrupper från DNA, RNA och nukleotider. Detta enzym tar också bort fosfatgrupper från proteiner.
FastAP är ett nytt alkaliskt fosfatas, som är aktivt i alla Thermo Scientific restriktionsenzymbuffertar såväl som i PCR-buffertar. Den defosforylerar alla typer av DNA-ändar (trubbiga, 5'- och 3'-överhäng) på 10 minuter vid 37 °C. Enzymet inaktiveras på 5 minuter vid 75 °C. Därför krävs inte avlägsnande av alkaliskt fosfatas före ligering.
Höjdpunkter
- Rekombinant enzym
- Snabb defosforylering – 10 minuter vid 37 °C
- Snabb och fullständig inaktivering – 5 minuter vid 75 °C
- Samtidig digestion och defosforylering av vektor-DNA
- 100 % aktiv i restriktionsenzym och PCR-buffertar
- Ett protokoll för alla typer av DNA-ändar:
- 5’ -överhäng
- 3’ -överhäng
- trubbiga ändar
- enkla nukleotider
- PCR-sanering i samband med Exo I
- Proteindefosforylering
Användningsområden
- Defosforylering av kloningsvektor-DNA för att förhindra recirkularisering under ligering
- Samtidig digestion och defosforylering av vektor-DNA
- Rengöring av PCR-produkter: nukleotidnedbrytning före sekvensering av PCR-produkt
- Defosforylering av nukleinsyra 5'-terminaler före märkning med T4 polynukleotidkinas
- Andra tillämpningar där defosforylering av DNA- och RNA-substrat är nödvändig
- Proteindefosforylering
Notera
- Bindning av FastAP Värmekänsligt alkaliskt fosfatas mot DNA kan resultera i ett bandskifte i agarosgeler. För att undvika detta, inkubera prover med 6 X DNA Loading Dye& SDS- lösning vid °65 C i 10 minuter och kyl på is före elektrofores.
- FastAP Värmekänsligt alkaliskt fosfatas är aktivt i alla restriktionsenzymbuffertar och kan tillsättas direkt till digererat DNA. Värmeinaktivering av restriktionsenzymet före defosforyleringsreaktionen är inte nödvändig.
Specifikationer
Specifikationer
| Koncentration | 1 U/μl |
| Enzym | Fosfatas |
| Kompatibel buffert | PCR-buffert, enzymbuffert |
| Kvantitet | 300 enheter |
| Produkttyp | Alkaliskt fosfatas |
Endast för forskning. Ej för diagnostik.
Din input är viktig för oss. Fyll i det här formuläret för att ge feedback relaterad till innehållet på denna produkt.