Läs mer
Thermo Scientific™ FastAP Värmekänsligt alkaliskt fosfatas (1 U/μ L)
Handla allt Thermo Scientific ProdukterBeskrivning
FastAP Värmekänsligt alkaliskt fosfatas katalyserar frisättningen av 5'- och 3'-fosfatgrupper från DNA, RNA och nukleotider. Detta enzym tar också bort fosfatgrupper från proteiner.
FastAP är ett nytt alkaliskt fosfatas, som är aktivt i alla Thermo Scientific restriktionsenzymbuffertar såväl som i PCR-buffertar. Den defosforylerar alla typer av DNA-ändar (trubbiga, 5'- och 3'-överhäng) på 10 minuter vid 37 °C. Enzymet inaktiveras på 5 minuter vid 75 °C. Därför krävs inte avlägsnande av alkaliskt fosfatas före ligering.
Höjdpunkter
- Rekombinant enzym
- Snabb defosforylering – 10 minuter vid 37 °C
- Snabb och fullständig inaktivering – 5 minuter vid 75 °C
- Samtidig digestion och defosforylering av vektor-DNA
- 100 % aktiv i restriktionsenzym och PCR-buffertar
- Ett protokoll för alla typer av DNA-ändar:
- 5’ -överhäng
- 3’ -överhäng
- trubbiga ändar
- enkla nukleotider
- PCR-sanering i samband med Exo I
- Proteindefosforylering
Användningsområden
- Defosforylering av kloningsvektor-DNA för att förhindra recirkularisering under ligering
- Samtidig digestion och defosforylering av vektor-DNA
- Rengöring av PCR-produkter: nukleotidnedbrytning före sekvensering av PCR-produkt
- Defosforylering av nukleinsyra 5'-terminaler före märkning med T4 polynukleotidkinas
- Andra tillämpningar där defosforylering av DNA- och RNA-substrat är nödvändig
- Proteindefosforylering
Notera
- Bindning av FastAP Värmekänsligt alkaliskt fosfatas mot DNA kan resultera i ett bandskifte i agarosgeler. För att undvika detta, inkubera prover med 6 X DNA Loading Dye& SDS- lösning vid °65 C i 10 minuter och kyl på is före elektrofores.
- FastAP Värmekänsligt alkaliskt fosfatas är aktivt i alla restriktionsenzymbuffertar och kan tillsättas direkt till digererat DNA. Värmeinaktivering av restriktionsenzymet före defosforyleringsreaktionen är inte nödvändig.
Specifikationer
Specifikationer
| Koncentration | 1 U/μl |
| Enzym | Fosfatas |
| Kompatibel buffert | PCR-buffert, enzymbuffert |
| Kvantitet | 300 enheter |
| Produkttyp | Alkaliskt fosfatas |
Endast för forskning. Ej för diagnostik.
By clicking Submit, you acknowledge that you may be contacted by Fisher Scientific in regards to the feedback you have provided in this form. We will not share your information for any other purposes. All contact information provided shall also be maintained in accordance with our Privacy Policy.