MP Biomedicals™ FastCellular™ Senescence Detection Kit, SPiDER-Β Tjej

Cellulär senescens är ett fenomen genom vilket normala celler upphör att dela sig och går in i ett tillstånd av irreversibel tillväxtstopp. Det är en av de mest grundläggande aspekterna av cellulärt beteende och anses allmänt vara associerad med tumörundertryckande mekanismer och en underliggande orsak till åldrande. ÅlderdomsassocieradΒ -galaktosidas (SA-Β -gal), som överuttrycks i åldrande celler, har använts i stor utsträckning som en markör för cellulär åldrande. Även om X-gal är ett välkänt reagens som används för att detektera SA-Β -gal, X-gal har följande nackdelar: 1) krav på fixerade celler på grund av dålig cellpermeabilitet, 2) låg kvantitativ förmåga på grund av svårigheten att visuellt differentiera färgade vs icke-färgade celler 3) krav på långa färgningstider.

För att övervinna nackdelarna med att använda X-gal använder vi ett nytt reagens och en ny metod för att detektera cellulär senescens. Spindel-Β Gal erbjuder ökad känslighet för att detektera SA-Β -gal på grund av ökad cellpermeabilitet och retention inuti celler. Jämfört med X-gal-metoden är FastCellular Senescence Detection Kit kan användas för både levande och fixerade celler, eftersom vi tillhandahåller Bafilomycin A1 för att specifikt hämma endogenΒ -galaktosidasaktivitet i levande celler och därmed öka detektionsspecificiteten för levande celler. För fasta celler, SA-Β -gal kan detekteras med SPiDER-Β Gal- och Mcllvaine-buffert (pH 6,0, se protokollet för analyser av fixerade celler). Sedan SPiDER-Β Gal avger stark och stabil fluorescens efter reaktionen med SA-Β -gal, den kan tillämpas på kvantitativ analys med flödescytometri. Dessutom är färgningstiden endast 30 minuter. Satsen innehåller en platta med 6 brunnar med 1 enhet SPiDER-Β Gal och 1 enhet Bafilomycin A1

Fördelar med att använda FastCellular Senescence Detection Kit:

• Högre känslighet på grund av en ny fluorogen detektionssond
• Tillämplig för levande celler och fixerade vävnader
• Förmåga att kvantifiera SA-Β -gal i cellulär senescensanalys
• Kort färgningstid (30 min)