Thermo Scientific™ BstXI (10 U/μ L)

5'...CCANNNNN▵NTG G...3'

3'...GGTN▵NNNNNAC C...5'

Villkor för 100 % aktivitet:

• b1X buffert O: 50 mM Tris-HCl (pH 7,5 vid 37 °C), 10 mM _MgCl2 , 100 mM NaCl och 0,1 mg/ml BSA
• Inkubera vid 55 °C

Förvaringsbuffert:

• BstXI levereras i: 10 mM Tris-HCl (pH 7,5 vid 25 °C), 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 0,2 mg/ml BSA och 50 % (v/v) glycerol

Ligering och återklyvning:

• Efter 50-faldig översmältning med BstXI kan cirka 95 % av DNA-fragmenten ligeras och skäras igen

Metyleringseffekter:

• Dam: överlappar aldrig— ingen effekt
• Dcm: kan överlappa varandra— klyvningsförsämrad
• CpG: överlappar aldrig— ingen effekt
• EcoKI: överlappar aldrig— ingen effekt
• EcoBI: överlappar aldrig— ingen effekt

Digestion av agaros-inbäddat DNA:

• Minst 5 enheter av enzymet krävs för fullständig nedbrytning av μ1 g agarosinbäddat lambda-DNA på 16 timmar

Anmärkning:

Inkubation vid 37 °C resulterar i 50 % aktivitet. Mer än 15-faldig översmältning med BstXI kan resultera i stjärnaktivitet. BstXI-klyvning försämras av överlappande dcm- metylering. För att undvika dcm- metylering, använd en dam-, dcm -stam som GM2163 (#M0099).