Läs mer
Thermo Scientific™ CloneJET PCR Cloning Kit
Handla allt Thermo Scientific ProdukterBeskrivning
CloneJET PCR Cloning Kit är ett avancerat positivt urvalssystem för högeffektiv kloning av PCR-produkter som genererats med vilket termostabilt DNA-polymeras som helst. Alla andra trubbiga eller klibbiga DNA-fragment kan klonas. Den är idealisk för fosforylerade eller icke-fosforylerade DNA-fragment. Ligering in i den inkluderade positiva selektionsvektorn tar bara 5 minuter, vilket ger mer än 99 % rekombinanta kloner. Trubbiga PCR-produkter genererade med ett korrekturläsningsenzym ligeras direkt in i kloningsvektorn.
PCR-produkter genererade antingen med icke-korrekturläsande DNA-polymeraser eller blandningar av DNA-polymeraser trubbigas före ligering på 5 minuter med det termostabila DNA Blunting Enzyme som medföljer kitet. Alla vanliga laboratorie- E. coli- stammar kan transformeras direkt med ligeringsprodukten.
Satsen innehåller en ny, bruksfärdig positiv selektionskloningsvektor pJET1.2/blunt. Vektorn innehåller en letal restriktionsenzymgen som störs genom ligering av en DNA-insättning i kloningsstället. Som ett resultat kan endast bakterieceller med rekombinanta plasmider bilda kolonier. Recirkulariserade pJET1.2/trubbiga vektormolekyler som saknar ett insert uttrycker ett dödligt restriktionsenzym som dödar värd- E.coli- cellen efter transformation. Denna positiva selektion påskyndar drastiskt processen för koloniscreening och eliminerar ytterligare kostnader som krävs för blå/vit selektion. För enkelhetens skull vid kartläggning och manipulation av insättningen innehåller pJET1.2/trubbiga kloningsvektors multipla kloningsställe två Bglll-igenkänningssekvenser som flankerar insättningsstället. Dessutom innehåller vektorn en T7-promotor för transkription in vitro och in vivo såväl som sekvensering av insättningen.
- Snabb —PCR-kloning på bara 5 minuter
- Högsta effektivitet— >99 % av positiva kloner
- Ingen kloningsbakgrund —positiv urvalsvektor
- Mångsidig —idealisk för kloning med trubbiga eller klibbiga ändar
- Ekonomisk —ingen dyr blå/vit skärm
Rekommenderas för:
Kloning av trubbiga ändar eller 3'-dA-svansade PCR-produkter upp till 10 kb; Kloning av DNA-fragment genererade av restriktionsenzymer; Sekvensering av klonat DNA; In vitro och in vivo transkription av klonade insättningar från T7-promotom
Anmärkning:
Före elektroporering kolonnrena alltid ligeringsblandningen med t.ex. GeneJET PCR-reningskit,† K0701, eller kloroformextraktsats. Elektroporation hämmas av närvaron av proteiner och salter i blandningen.
Specifikationer
Specifikationer
| Antibiotikaresistens bakterie | Ampicillin (AmpR) |
| Kloningsmetod | Restriktionsenzym⁄ MCS, trubbig PCR |
| Formatera | Sats |
| Provtyp | PCR-produkter |
| För användning med (applikation) | PCR-kloning |
| Antal reaktioner | 20 reaktioner |
| Produktlinje | CloneJET |
| Produkttyp | PCR Cloning Kit |
| Kvantitet | 20 reaktioner |
| Vektor | pJET1,2/trubbig |
Endast för forskning. Ej för diagnostik.
Din input är viktig för oss. Fyll i det här formuläret för att ge feedback relaterad till innehållet på denna produkt.