Thermo Scientific™ CloneJET PCR Cloning Kit

Satsen innehåller en ny, bruksfärdig positiv selektionskloningsvektor pJET1.2/blunt. Vektorn innehåller en letal restriktionsenzymgen som störs genom ligering av en DNA-insättning i kloningsstället. Som ett resultat kan endast bakterieceller med rekombinanta plasmider bilda kolonier. Recirkulariserade pJET1.2/trubbiga vektormolekyler som saknar ett insert uttrycker ett dödligt restriktionsenzym som dödar värd- E.coli- cellen efter transformation. Denna positiva selektion påskyndar drastiskt processen för koloniscreening och eliminerar ytterligare kostnader som krävs för blå/vit selektion. För enkelhetens skull vid kartläggning och manipulation av insättningen innehåller pJET1.2/trubbiga kloningsvektors multipla kloningsställe två Bglll-igenkänningssekvenser som flankerar insättningsstället. Dessutom innehåller vektorn en T7-promotor för transkription in vitro och in vivo såväl som sekvensering av insättningen.

• Snabb —PCR-kloning på bara 5 minuter
• Högsta effektivitet— >99 % av positiva kloner
• Ingen kloningsbakgrund —positiv urvalsvektor
• Mångsidig —idealisk för kloning med trubbiga eller klibbiga ändar
• Ekonomisk —ingen dyr blå/vit skärm

Rekommenderas för:

Kloning av trubbiga ändar eller 3'-dA-svansade PCR-produkter upp till 10 kb; Kloning av DNA-fragment genererade av restriktionsenzymer; Sekvensering av klonat DNA; In vitro och in vivo transkription av klonade insättningar från T7-promotom

Anmärkning:

Före elektroporering kolonnrena alltid ligeringsblandningen med t.ex. GeneJET PCR-reningskit,† K0701, eller kloroformextraktsats. Elektroporation hämmas av närvaron av proteiner och salter i blandningen.