Thermo Scientific™ NotI, HC (50 U/μ L)

5'..GC▵GGCCG C...3'

3'..CGCCGG▵C G...5'

Villkor för 100 % aktivitet:

• 1X buffert O: 50 mM Tris-HCl (pH 7,5 vid 37 °C), 10 mM _MgCl2 , 100 mM NaCl och 0,1 mg/ml BSA
• Inkubera vid 37 °C

Förvaringsbuffert:

• NotI levereras i: 20 mM Tris-HCl (pH 7,8 vid 25 °C), 100 mM NaCl, 0,1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0,02 % Triton X-100 0,2 mg/ml BSA och 50 % (volym/volym) glycerol

Ligering och återklyvning:

• Efter 50-faldig översmältning med NotI kan mer än 95 % av DNA-fragmenten ligeras och skäras igen

Metyleringseffekter:

• Dam: överlappar aldrig— ingen effekt
• Dcm: överlappar aldrig— ingen effekt
• CpG: överlappar helt— blockerad
• EcoKI: överlappar aldrig— ingen effekt
• EcoBI: överlappar aldrig— ingen effekt

Digestion av agaros-inbäddat DNA:

• Minst 5 enheter av enzymet krävs för fullständig nedbrytning av μ1 g agarosinbäddat Adenovirus-2 DNA på 16 timmar

Kompatibla ändar:

• Bsp120I, CfrI, Eco52I

Anmärkning:

Analyserades med användning av pTZ19RJL2-plasmid-DNA digererad med BseLI. Supercoilade plasmider kan kräva upp till 5 gånger mer NotI för fullständig digestion än linjära DNA.