missing translation for 'onlineSavingsMsg'
Läs mer

Thermo Scientific™ T4 Polynukleotidkinas (10 U/μ L)

Produktkod. p-4521372 Handla allt Thermo Scientific Produkter
Klicka för att se tillgängliga alternativ
Kvantitet:
2 500 U
500 U
Förpackningsstorlek:
2500 enheter
Denna artikel kan inte returneras. Se returpolicy

Produktkod. 10120670

Brand: Thermo Scientific™ EK0031

Vänligen för att beställa denna produkten. Behöver du ett Webbkonto? Registrera ditt konto idag!

Denna artikel kan inte returneras. Se returpolicy

T4 Polynukleotidkinas (T4 PNK) katalyserar överföringen av gamma-fosfat från ATP till 5'-OH-gruppen av oligonukleotider, ss och dsDNA och RNA.

T4 Polynukleotidkinas (T4 PNK) katalyserar överföringen av gamma-fosfat från ATP till 5'-OH-gruppen av enkel- och dubbelsträngade DNA och RNA, oligonukleotider eller nukleosid 3'-monofosfater (framåtreaktion). Reaktionen är reversibel. I närvaro av ADP T4 Polynukleotidkinas uppvisar 5'-fosfatasaktivitet och katalyserar utbytet av fosfatgrupper mellan 5'-P-oligopolynukleotider och ATP (utbytesreaktion).

Enzymet är också ett 3'-fosfatas.

  • Aktiv i restriktionsenzym, RT och T4 DNA-ligasbuffertar.
  • Källa: E. coli -celler med en klonad pseT-gen av bakteriofag T4
  • Molekylvikt: Enzymet är en homotetramer. Den består av fyra identiska subenheter på 28,9 kDa
Kvalitetskontroll:
  • Frånvaron av endo-, exodeoxiribonukleaser och ribonukleaser bekräftas av lämpliga kvalitetstester. Funktionstestad för märkning av 5ft.-terminaler av DNA
Källa:
  • E.coli -celler med en klonad pseT -gen av bakteriofag T4
Molekylvikt:
  • Enzymet är en homotetramer. Den består av fyra identiska underenheter på 28,9 kDa
Definition av aktivitetsenhet:
  • En enhet av enzymet överför 1nmol gamma-fosfat från ATP till 5 ft.-OH DNA på 30 min. vid 37 °C
  • Enzymaktivitet analyseras i följande blandning: 100 mM Tris-HCl (pH 8,0), 10 mM MgCl2, 5 mM DTT, 0,5 mM 5ft-OH DNA, 0,05 mM ATP och 0,1 MBq/ml [gamma- 33P ]-ATP
Förvaringsbuffert:
  • Enzymet tillhandahålls i: 20 mM Tris-HCl (pH 7,5), 25 mM KCl, 0,1 mM EDTA, 2 mM DTT och 50 % (v/v) glycerol
  • 10X reaktionsbuffert A (för framåtreaktion): 500 mM Tris-HCl (pH 7,6 vid 25 °C), 100 mM MgCl2 , 50 mM DTT, 1 mM spermidin
  • 10X reaktionsbuffert B (för utbytesreaktion): 500 mM imidazol-HCl (pH 6,4 vid 25 °C), 180 mM MgCl2 , 50 mM DTT, 1 mM spermidin och 1 mM ADP
  • 24 % PEG-lösning: 24 % (vikt/volym) polyetylenglykol 6000
  • Hämning och inaktivering:
    • Inhibitorer: metallkelatorer, fosfat- och ammoniumjoner, KCl och NaCl i en koncentration högre än 50 mM
    • Inaktiveras genom uppvärmning vid 75 °C i 10 min. eller genom tillägg av EDTA

    Rekommenderas för:

    Märkning av 5 ft.-termini av nukleinsyror (3, 4) som ska användas som prober för hybridisering, prober för transkriptkartläggning, markörer för gelelektrofores, primers för DNA-sekvensering, primers för PCR; 5 ft.-fosforylering av oligonukleotid, PCR-produkter, annat DNA eller RNA före ligering; Fosforylering av PCR-primrar; Detektion av DNA-modifiering genom [32P]-eftermärkningsanalysen (5, 6); Avlägsnande av 3ft.-fosfatgrupper (2)

    Anmärkning:

    Polyetylenglykol (PEG) och spermidin förbättrar hastigheten och effektiviteten av fosforyleringsreaktionen (7). PEG används i utbytesreaktionsblandningen. Som T4 Polynukleotidkinas hämmas av ammoniumjoner, använd natriumacetat för att fälla ut DNA före fosforylering (1, 2).

TRUSTED_SUSTAINABILITY

Specifikationer

Koncentration 10 U/μ L
Enzym T4 Polynukleotidkinas
Kompatibel buffert 10X reaktionsbuffert
Kvantitet 500 U
Produkttyp T4 Polynukleotidkinas

Endast för forskning. Ej för diagnostik.

Korrigering av produktinnehåll

Din input är viktig för oss. Fyll i det här formuläret för att ge feedback relaterad till innehållet på denna produkt.

Produkttitel

Genom att klicka på Skicka bekräftar du att du kan bli kontaktad av Fisher Scientific angående feedbacken du har lämnat i detta formulär. Vi kommer inte att dela din information för andra ändamål. All kontaktinformation som tillhandahålls ska också underhållas i enlighet med vår Sekretesspolicy.

Tack! Din feedback har skickats. Fisher Scientific arbetar alltid för att förbättra vårt innehåll åt dig. Vi uppskattar din feedback.