Thermo Scientific™ T4 RNA-ligas (10 U/μ L)

• Källa: E. coli -celler med en klonad gen 63 av bakteriofag T4
• Molekylvikt: 43,6 kDa monomer

• Frånvaron av ribonukleaser, exodeoxiribonukleaser, endodeoxiribonukleaser och fosfataser bekräftas av lämpliga kvalitetstester.

• E.coli -celler med en klonad gen 63 av bakteriofag T4

Molekylvikt:

• 43,6 kDa monomer

Definition av aktivitetsenhet:

• En enhet av enzymet katalyserar omvandlingen av 1nmol av 5ft.-[ ^32P ]-(A) _12-18 till en fosfatasresistent form på 30 minuter. vid 37 °C
• Enzymaktivitet analyseras i följande blandning: 50 mM Tris-HCl (pH 7,5), 10 mM _MgCl2 , 10 mM DTT, 1 mM ATP , 10 M μ5'-[ ^32P ]-(A) _12-18 (10 M μi 5 fot-terminaler)

Förvaringsbuffert:

• Enzymet tillhandahålls i: 20 mM Tris-HCl (pH 7,5), 1 mM DTT, 50 mM KCl, 0,1 mM EDTA, 0,03 % (v/v) ELUGENT Rengöringsmedel och 50 % (v/v) glycerol

10X reaktionsbuffert:

• 500 mM Tris-HCl (pH 7,5 vid 25 °C), 100 mM _MgCl2 , 100 mM DTT, 10 mM ATP

Hämning och inaktivering:

• Inhibitorer: metallkelatorer, SH-gruppmodifierande reagens (8).
• Inaktiveras genom uppvärmning vid 70 °C i 10 min.

Rekommenderas för:

RNA 3'-änd-märkning med cytidin 3',5'-bis [alfa- ^32P ] fosfat (1); Förening av RNA till RNA (2); Syntes av oligoribonukleotider och oligodeoxiribonukleotider (3, 4); Specifika modifieringar av tRNA (5); Oligodeoxiribonukleotidligering till enkelsträngade cDNA under 5 fot. RACE (snabb amplifiering av cDNA-ändar) (6); Platsspecifik generering av kompositprimers för PCR (7)

Anmärkning:

Den rekommenderade BSA-koncentrationen i reaktionsblandningen är 0,1 mg/ml.