Molecular Probes™ Fluo-4, AM, cellpermeant

Märkta kalciumindikatorer är molekyler som uppvisar en ökning av fluorescens vid bindning av Ca²⁺. Fluo-3 har använts för att avbilda den rumsliga dynamiken hos Ca^2+- signalering, i flödescytometriexperiment som involverar fotoaktivering av burade chelatorer, andra budbärare och signalsubstanser, samt för cellbaserad farmakologisk screening. Fluo-4 är en analog till fluo-3 där de två klorsubstituenterna ersätts av fluoriner, vilket resulterar i ökad fluorescensexcitation vid 488 nm och därmed högre fluorescenssignalnivåer. Celler kan laddas med AM-esterformer av dessa kalciumindikatorer genom att tillsätta den lösta indikatorn direkt till skålar med odlade celler. Dessa indikatorer är användbara för fluorescens- och konfokalmikroskopi, flödescytometri och mikroplattscreening.

Kalciumindikator (AM Ester) specifikationer:

• Etikett (ex/Em av Ca²⁺–bunden form): Fluo-4 (494/506 nm)
• Fluorescensintensiteten ökar vid bindning Ca²⁺: >100 gånger
• K_d för Ca²⁺ i buffert: ∼335 nM
• Uppvisar fluorescensökning vid bindning Ca²⁺ med liten våglängdsförskjutning

Användning av TPEN för att kontrollera tungmetallkatjoner

Dessutom binder BAPTA-baserade indikatorer som dessa olika tungmetallkatjoner (t.ex. Mn²⁺, Zn²⁺, Pb²⁺) med avsevärt högre affinitet än Ca²⁺. Störningar i kalciummätningar orsakade av närvaron av dessa joner kan kontrolleras med hjälp av tungmetallselektiv kelator TPEN (Cat. Nr. T1210).

Fler val för fluorescerande kalciumindikatorer

Vi erbjuder ett stort urval av Molecular Probes™ kalciumindikatorer för användning i olika experimentella scenarier. För mer information, läs Fluorescent Ca²⁺ Indicators Excited with Visible Light—avsnitt 19.3 i Molecular Probes™ handboken.

För UV-exciterbara Ca^2+- indikatorer, proteinbaserade Ca²⁺ -indikatorer, konjugerade av Ca²⁺ -indikatorer och för fluorescensbaserade indikatorer för andra metalljoner (dvs. Mg²⁺, Zn²⁺) granska indikatorer för Ca²⁺, Mg²⁺, Zn²⁺ och andra metalljoner—kapitel 19 i Molecular Probes™ handboken.

I reducerat tillstånd är excitations- och emissionsmaxima för BODIPY™ 581/591 undekansyra 581/591 nm; efter oxidation förskjuter proben excitationen och emissionen till 488/510 nm.

Vi rekommenderar att lösa i högkvalitativ vattenfri DMSO för lagerkoncentrationer på 1 till 5 mM.