Invitrogen™ GeneArt™ Gibson Assembly EX Cloning Kit, elektrokompetenta celler

De GeneArt Gibson Assembly EX Cloning Kit möjliggör DNA-sammansättning via en teknik som gör att upp till 15 överlappande DNA-fragment kan länkas sömlöst i en enkelrörs, tvåstegsoptimerad reaktion. DNA-fragment av olika längder sätts samman enhetligt med hjälp av komplementära överlappningar mellan fragment. Den inneboende flexibiliteten och framgången för detta tillvägagångssätt är lämplig för små och stora DNA-konstruktioner, inkluderar både enkla och multipla insättningar och har använts för att bygga hela genom. De resulterande produkterna kan användas för en mängd olika nedströmsapplikationer, inklusive transformation, PCR och rullande cirkelförstärkning (RCA ). De GeneArt Gibson Assembly EX Cloning Kit, elektrokompetenta celler, är ett komplett kit som inkluderar mastermix, positiv kontroll, vatten och ElectroMAX DH10B elektrokompetent E. coli.

Funktioner av GeneArt Gibson Assembly EX Cloning Kit inkluderar:

• Enkel —sömlös sammansättning och klona upp till 15 DNA-fragment i en enda reaktion
• Effektiv —robust effektivitet ger framgångsrika kloner för både enkla och utmanande konstruktioner
• Flexibla —designriktlinjer tillåter montering i valfri vektor som du väljer
• Bekvämt —tillgängligt som mastermixsatser och kloningssatser kompletta med kemiska eller elektrokompetenta celler
• Litade —på över 4000 citeringar i den vetenskapliga litteraturen som lyfter fram stor framgång

Sömlös montering av upp till 15 fragment

GeneArt Gibson Assembly EX kloning är en robust, enkelrörsprocess i två steg där upp till 15 insertioner och vektor kombineras i en proprietär enzymatisk blandning för att montera DNA-fragment med delad terminaländhomologi utan att lämna några extra sekvenser eller ärr efter sig (sömlösa). Efter att denna dubbelt optimerade reaktion är klar, omvandlas en del av sammansättningsreaktionen till kemiskt kompetenta eller elektrokompetenta celler, vilket ger kloner redo för analys nästa dag. Den erforderliga ändhomologin på 20 till 40 baspar är utformad i de novo-fragmentet för syntes eller kan enkelt konstrueras genom PCR-amplifiering med anpassade DNA-oligo. Denna speciella enzymblandning skapar en sömlös och kovalent bunden DNA-konstruktion som ger hög effektivitet.

Robust metod för maximal effektivitet

På grund av den kovalent bundna slutprodukten, GeneArt Gibson Assembly EX Metoden tillåter användning av kemiskt kompetenta celler eller elektrokompetenta celler för högsta transformationseffektivitet, särskilt viktigt för utmanande konstruktioner. Det finns inget behov av restriktionsenzymer, ligering eller rekombinationsställen, och metoden ger en perfekt sömlös konstruktion utan oönskade extra baser.

Ger stor mångsidighet

De GeneArt Gibson Assembly EX Metoden ger mångsidighet, kan effektivisera många tekniker genom snabb kombination, tillägg, radering eller utbyte av DNA-segment och eliminerar behovet av subkloning, vilket sparar tid och ansträngning i kloningsarbetsflödet.