Invitrogen™ GeneArt™ Gibson Assembly HiFi Cloning Kit, kemiskt kompetenta celler

De GeneArt Gibson Assembly HiFi Cloning Kit möjliggör DNA-sammansättning och kloning via en teknik som gör att flera överlappande DNA-fragment kan kopplas sömlöst i en enstegs, 15 60 –minuters isotermisk reaktion. DNA-fragment av olika längder sätts samman enhetligt med hjälp av komplementära överlappningar mellan fragment. Den inneboende flexibiliteten i detta tillvägagångssätt är lämplig för små och stora DNA-konstruktioner och inkluderar både enkla och multipla insättningar. De resulterande produkterna kan användas för en mängd olika nedströmsapplikationer inklusive transformation, PCR och rullande cirkelförstärkning (RCA ). De GeneArt Gibson Assembly HiFi Cloning Kit, kemiskt kompetenta celler, är ett komplett kit som inkluderar mastermix, positiv kontroll, vatten och One Shot TOP10 kemiskt kompetent E. coli.

Funktioner av GeneArt Gibson Assembly HiFi Cloning Kit inkluderar:

• Enkel —sömlös sammansättning och klona upp till sex DNA-fragment i en enda reaktion
• Effektiv —high fidelity ger mer korrekta kloner än andra metoder
• Flexibla —designriktlinjer tillåter montering i valfri vektor som du väljer
• Bekvämt —tillgängligt som mastermixsatser och kloningssatser kompletta med kemiska eller elektrokompetenta celler
• Litade —på över 4000 citeringar i den vetenskapliga litteraturen som lyfter fram stor framgång

Sömlös sammansättning av flera fragment

GeneArt Gibson Assembly HiFi-kloning är en enkel process i ett steg där upp till sex fragment kombineras i en patenterad enzymblandning för att sammanställa DNA-fragment med delad terminaländhomologi utan att lämna några extra sekvenser eller ärr efter sig (sömlösa). Efter en –15 60 minuters inkubation omvandlas sedan en del av sammansättningsreaktionen till kemiskt kompetenta eller elektrokompetenta celler, vilket ger kloner som är redo för analys nästa dag. Den erforderliga ändhomologin på 20 till 40 baspar är utformad i de novo-fragmentet för syntes eller kan enkelt konstrueras genom PCR-amplifiering med anpassade DNA-oligo. Denna speciella enzymblandning skapar en sömlös och kovalent bunden DNA-konstruktion som ger hög effektivitet.

Robust metod för maximal effektivitet

På grund av den kovalent bundna slutprodukten, GeneArt Gibson Assembly HiFi-metoden tillåter användning av kemiskt kompetenta celler eller elektrokompetenta celler för högsta transformationseffektivitet, vilket förbättrar framgången med att hitta rätt klon, särskilt för mer utmanande konstruktioner. Det finns inget behov av restriktionsenzymer, ligering eller rekombinationsställen, och metoden ger en perfekt sömlös konstruktion utan oönskade extra baser.

Ger stor mångsidighet

De GeneArt Gibson Assembly HiFi-metoden ger mångsidighet, kan effektivisera många tekniker genom snabb kombination, tillägg, radering eller utbyte av DNA-segment och eliminerar behovet av subkloning, vilket sparar tid och ansträngning i kloningsarbetsflödet.