Thermo Scientific™ GeneBLAzer™ PR DA Assay Kit

GeneBLAzer ™PR DA (Division Arrested)-celler och PR-UAS-bla HEK 293T-celler innehåller den ligandbindande domänen (LBD) av den humana progesteronreceptorn (PR ) smält till den DNA-bindande domänen av GAL4 stabilt integrerad i GeneBLAzer ™UAS-bla HEK 293T-cellinjen. GeneBLAzer ™UAS-bla HEK 293T-celler uttrycker stabilt en beta-laktamasreportergen under transkriptionskontroll av en uppströms aktivatorsekvens (UAS). När en agonist binder till LBD av GAL4 (DBD)-PR (LBD) fusionsproteinet, binder proteinet till UAS, vilket resulterar i uttryck av beta-laktamas. Division Arrested (DA) celler finns tillgängliga i två konfigurationer - ett analyskit (som innehåller celler och tillräckligt med substrat för att analysera 1 x 384-brunnars platta), och ett rör med celler som är tillräckligt för att analysera 10 x 384-brunnars plattor. DA-celler avbryts irreversibelt med användning av en lågdosbehandling av Mitomycin-C och har ingen uppenbar toxicitet eller förändring i cellulär signaltransduktion. Både PR DA-celler och PR UAS-bla HEK 293T-celler är funktionellt validerade för Z'- och EC _50- koncentrationer av R5020. Dessutom har PR-UAS-bla HEK 293T-celler testats för analysprestanda under varierande förhållanden, inklusive DMSO-koncentration, cellantal, stimuleringstid och substratladdningstid (data tillgänglig på begäran). Ytterligare testdata med hjälp av alternativa stimuli finns också tillgängliga.