Invitrogen™ BLOCK-iT™ Lentiviralt RNAi Gateway™ Vektor Kit

En ny kloningsprocess placerar en ca. 50-bp DNA-oligonukleotid omedelbart efter en U6 pol III-promotor in i BLOCK-iT U6 ingångsvektor. Oligonukleotiden är utformad för att uttrycka RNA som bildar en stamLoop-struktur som innehåller sense- och antisens-regionerna för din målgen av intresse. Detta shRNA rekombineras sedan in i pLenti6/BLOCK-iT-DEST vektorn. Efter viral produktion och transduktion blir shRNA som drivs av U6-promotorn stabilt integrerat som en RNAi-kassett. Det genererade shRNA:t undviker värdens försvarsmekanism och kommer att vara effektivt för att producera RNAi-genen knockdown-svar. Med hjälp av BLOCK-iT Lentiviral RNAi Expression System, långtidsanalys av genblockering i både delande och icke-delande däggdjurscelltyper och djurmodeller kan uppnås.

De BLOCK-iT RNAi U6 Entry Vector Kit tillåter strömlinjeformad kloning av shRNA-målsekvenser för testning i övergående experiment. Utvalda RNAi-expressionskassetter rekombineras snabbt och effektivt från BLOCK-iT RNAi U6-ingångsvektor i pLenti6/BLOCK-iT-DEST-vektorn via en standard Gateway LR-rekombinationsreaktion.

• att R-platser för effektiv rekombination med den att L-flankerade U6 Gateway™ ingångsvektor som innehåller RNAi-kassetten
• Alla nödvändiga komponenter för effektiv lentiviral förpackning och leverans av shRNA av intresse
• Blasticidinselektionsmarkör för snabbt, effektivt urval av stabila cellinjer som uttrycker shRNA

Kloning, Gateway-kloning, Lentiviral shRNA och miRNA, RNAi, RNAi, epigenetik och icke-kodande RNA-forskning, virusbaserad RNAi