Läs mer
Invitrogen™ BLOCK-iT™ Pol II miR RNAi Expression Vector Kit
Beskrivning
Innehåller
BLOCK-iT ™Pol II miR RNAi Expression Vector Kit innehåller två lådor. Kloningsboxen innehåller linjäriserad pcDNA ™6,2-GW/miR, 10X hybridiseringsbuffert, T4 DNA-ligas, 5X DNA-ligeringsbuffert, lacZ-kontrolloligo, lacZ-kontrollplasmid, negativ kontrollplasmid, DNas/RNasfritt vatten och framåt- och bakåtsekvenseringsprimrar.
pcDNA 6.2-™GW/miR-vektorn som ingår i BLOCK-iT Pol II miR RNAi Expression Vector Kit är designat för att uttrycka artificiella miRNA som är konstruerade för att ha 100 % homologi med din målsekvens och kommer att resultera i målklyvning. Denna vektor inkluderar flankerande och loop-sekvenser från ett endogent miRNA som styr excision av det konstruerade miRNA från ett längre Pol II-transkript (pre-miRNA). Använder Invitrogen's prisbelönt BLOCK-iT RNAi Designer, över 70% av konstruktionerna producerar mer än 70% knockdown. Pol II-uttryck av konstruerade miRNA möjliggör:
- Starkt uttryck från CMVs omedelbara tidiga promotor, med möjlighet att använda vävnadsspecifika eller andra reglerade promotorer via MultiSite Gateway™ rekombination
- Kompatibilitet med många av Invitrogen's Gateway destination (DEST) vektorer för genuttryck; inklusive lentivirala vektorer för stabil transduktion av delande, icke-delande och primära celltyper, Flp-In™ system för kromosomal integration på en plats och alternativa reporterfusionskonstruktioner
- Uttryck av mer än en konstruerad miRNA på samma transkript, vilket möjliggör knockdown av flera gener samtidigt och generering av syntetiska fenotyper
fungerar För höga uttrycksnivåer av din miR RNAi-sekvens inkluderar pcDNA6.2-GW/miR-vektorn CMV-promotom. Ange helt enkelt ett RefSeq-accessionsnummer eller en nukleotidsekvens i gratis online BLOCK-iT RNAi Designer och programvaran kommer att designa optimerade miRNA som har 100% homologi med målet av intresse. Klona miRNA i vektorn med hjälp av ett snabbt ligeringsprotokoll och transfektera för omedelbart miRNA-uttryck. Uttryckt miRNA bearbetas av det endogena cellulära maskineriet i kärnan (inklusive Drosha) och transporteras sedan in i cytoplasman där det vidarebearbetas av Dicer. Det fullständigt bearbetade miRNA:t inkorporeras sedan i RISC där det fungerar som ett siRNA och resulterar i klyvning av mRNA-målet.
För en mängd olika uttrycksalternativ kan miRNA-kassetten, miR-flankerande regioner och en miRNA som är homolog med målet av intresse lätt flyttas till en mängd olika DEST-vektorer. Detta sker genom Gateway-rekombinationsreaktioner där miRNA-kassetten överförs till en pDONR™ vektor (BP-reaktion) och sedan in i en valfri DEST-vektor (LR-reaktion).
Kloning, gatewaykloning, RNAi, RNAi, epigenetik och icke-kodande RNA-forskning, vektorbaserad RNAi
Specifikationer
Specifikationer
| Produkttyp | RNAi Expression Vector Kit |
| Innehåll och lagring | BLOCK-iT ™Pol II miR RNAi Expression Vector Kit innehåller två lådor. Kloningsboxen innehåller linjäriserad pcDNA ™6,2-GW/miR, 10X hybridiseringsbuffert, T4 DNA-ligas, 5X DNA-ligeringsbuffert, lacZ-kontrolloligo, lacZ-kontrollplasmid, negativ kontrollplasmid, DNas/RNasfritt vatten och framåt- och bakåtsekvenseringsprimrar. Förvara vektorerna, buffertarna, kontrolloligo och plasmider, vatten och sekvenseringsprimrar vid -20 °C. Den ena Shot™ lådan innehåller transformationsreagens inklusive tjugoen 50-μ l alikvoter av One Shot™ TOP10 Kemiskt kompetent E. coli, SOC-medium och en pUC19 supercoiled kontrollplasmid. Förvara dessa transformationsreagenser -80 °C. Alla reagenser är garanterade stabila i 6 månader när de förvaras på rätt sätt. |
| Kloningsmetod | Gateway™ |
| Konstitutivt eller inducerbart system | Konstitutiv |
| Leveranstyp | Transfektion |
| RNAi typ | miRNA [mikroRNA] |
| Urvalsagent (eukaryot) | Blasticidin |
| Vektor | BLOCK-iT RNAi vektorer |
| Promotor | CMV |
| Formatera | Kit |
| Visa mer |
Endast för forskning. Ej för diagnostik.
Genom att klicka på Skicka bekräftar du att du kan bli kontaktad av Fisher Scientific angående feedbacken du har lämnat i detta formulär. Vi kommer inte att dela din information för andra ändamål. All kontaktinformation som tillhandahålls ska också underhållas i enlighet med vår Sekretesspolicy.