Läs mer
Invitrogen™ BLOCK-iT™ U6 RNAi Entry Vector Kit
Beskrivning
Innehåller
De BLOCK-iT™ U6 Entry Vector Kit innehåller två lådor. Kloningslådan innehåller fyra rör med linjäriserad vektor vid 5 ng/rör, tillräckligt för att slutföra 5 kloningsreaktioner per rör. Dessutom ingår 250 μL 10X glödgningsbuffert, 20 μL T4 DNA-ligas, μ80 L 5X DNA-ligasbuffert, 1,4 ng lac Z-kontrolloligo, μ10 L lyofiliserad lac Z-kontrollplasmid, 1,5 ml DNas/RNasfritt vatten och μ2 g vardera framåt- och bakåtsekvenseringsprimer.
En enkel kloningsprocess placerar en ca. 50-bp oligonukleotid-DNA omedelbart efter en U6 pol III-typ promotor. Uttryck av denna RNAi-kassett bildar en shRNA-molekyl i cellen som kommer att bearbetas och fungera som kort interfererande RNA (siRNA) som kommer att generera RNAi-effekten.
Leverans av U6 RNAi-kassetten
När kloningen är klar är U6 Entry Vector redo att användas omedelbart i transienta transfektioner med ett reagens som t.ex. Lipofectamine™ 2000. Detta gör detta system idealiskt för initiala shRNA-screeningar i många däggdjurscelltyper. Som ett alternativ i svårtransfekterade eller icke-delande celltyper, eller för att leverera till djurmodellsystem, kan RNAi-kassetten enkelt kombineras till en BLOCK-iT Viral RNAi vektor. För stabil shRNA lentiviral leverans och uttryck, rekombinera BLOCK-iT U6 Entry Vector med pLenti6/BLOCK-iT RNAi vektor. För övergående leverans till utmanande celltyper med adenoviral transduktion, rekombinera med pAd/BLOCK-iT RNAi vektor. Representerar en föredragen teknik för att analysera gennedreglering.
Kloning, gatewaykloning, RNAi, RNAi, epigenetik och icke-kodande RNA-forskning, vektorbaserad RNAi
Specifikationer
Specifikationer
| Produkttyp | RNAi Entry Vector Kit |
| Innehåll och lagring | De BLOCK-iT™ U6 Entry Vector Kit innehåller två lådor. Kloningslådan innehåller fyra rör med linjäriserad vektor med 5 ng/rör, tillräckligt för att slutföra 5 kloningsreaktioner per rör. Dessutom ingår 250μ l 10X glödgningsbuffert, 20μ l T4 DNA-ligas, 80μ l 5X DNA-ligasbuffert, 1,4 ng lac Z-kontrolloligo, 10μ l lyofiliserad lac Z-kontrollplasmid, 1,5 ml DNas/RNasfritt vatten och 2μ g vardera av framåt- och bakåtsekvenseringsprimer. Förvara vektorerna, buffertarna, kontrolloligo och plasmid, vatten och sekvenseringsprimrar vid -20 °C. Den ena Shot™ lådan innehåller transformationsreagens inklusive tjugoen 50-μ l alikvoter av One Shot™ TOP10 Kemiskt kompetent E. coli , SOC-medium och en pUC19 supercoiled kontrollplasmid. Förvara vid -80 °C. Alla reagenser är garanterade stabila i 6 månader när de förvaras på rätt sätt. |
| Kloningsmetod | Gateway™ |
| Konstitutivt eller inducerbart system | Konstitutiv |
| Leveranstyp | Transfektion |
| RNAi typ | shRNA |
| Vektor | BLOCK-iT RNAi vektorer |
| Promotor | U6 |
| Formatera | Kit |
| Produktlinje | BLOCK-iT |
| Visa mer |
Endast för forskning. Ej för diagnostik.
Genom att klicka på Skicka bekräftar du att du kan bli kontaktad av Fisher Scientific angående feedbacken du har lämnat i detta formulär. Vi kommer inte att dela din information för andra ändamål. All kontaktinformation som tillhandahålls ska också underhållas i enlighet med vår Sekretesspolicy.