Invitrogen™ Dynabeads™ CD45

Dynabeads™ CD45 är superparamagnetiska pärlor kovalent kopplade till anti-human CD45-antikropp som möjliggör isolering eller utarmning av CD45 ⁺ leukocyter direkt från helblod, buffy coat eller MNC-suspensioner. Dynabeads™ CD45 kan också användas för att berika epiteltumörceller. CD45-antigenet uttrycks svagt på myeloidceller. För att effektivt tömma eller isolera alla leukocyter inklusive myeloidceller, använd Dynabeads™ CD15 (Kat. nr. 11137D) i kombination med Dynabeads™ CD45. Fördelar med Dynabeads™ CD45:

• Effektiv utarmning av humana leukocyter
• Isolering av leukocyter direkt från helblod för molekylära tillämpningar
• Anrikning av cirkulerande epiteltumörceller

Om Dynabeads™ CD45
Dynabeads™ CD45 är enhetliga, superparamagnetiska pärlor (4.5μ m diameter) belagd med en primär monoklonal mus-IgG _2a -antikropp specifik för ett CD45-membranantigen som är gemensamt för alla kända isoformer av CD45. CD45 uttrycks på alla humana leukocyter. På grund av pärlstorleken, Dynabeads™ CD45 kan enkelt och effektivt isolera eller tömma celler från viskösa prover som helblod och benmärg på cirka 30 minuter. Dynabeads™ CD45 används ofta för anrikning av cirkulerande icke-hematopoetiska tumörceller, genom utarmning av alla CD45 ⁺ -leucocyter från ett MNC-prov. Positivt isolerade celler kan användas för nedströms molekylära studier; till exempel de i vilka celler ska lyseras medan de fortfarande är fästa vid pärlor, och nukleinsyror eller proteiner renas ytterligare. Observera att intakta celler inte kommer att frigöras från dessa pärlor, och vi rekommenderar inte att analysera de pärlbundna cellerna med en flödescytometer.

Magnetisk –pärlbaserad separation ger enkel hantering
Dynabeads™ CD45 tillsätts till provet under kontinuerlig blandning för att optimera bindningen av den Dynabeads™ till målcellerna. Genom att placera provet på en magnet separerar det de pärlbundna målcellerna från resten av provet på bara 1 2 –minuter. För utarmning, ta bort supernatanten till ett nytt rör för ytterligare studier och kassera de pärlbundna cellerna. För positiv isolering för molekylära studier, ta bort supernatanten och tvätta de pärlbundna cellerna 2 3 –gånger i buffert för att få optimal renhet. Cellerna kan lyseras medan de fortfarande är fästa vid pärlorna och supernatanten kan överföras till ett nytt rör för nedströms molekylär analys. Startprover kan vara helblod, buffy coat, benmärg, PBMC eller vävnadsnedbrytningar.