Invitrogen™ Dynabeads™ MyOne™ Tosylaktiverad

När du vill koppla antikroppar, peptider, intakta proteiner och funktionella enzymer kovalent till ytan av en magnetisk pärla, välj Dynabeads Tosylaktiverad. Optimal antikroppsorientering gör dessa pärlor till ett utmärkt val för immunoutfällning av proteiner och proteinkomplex.

Idealisk för immunutfällning av proteinkomplex:
Låg bakgrund och kovalent länkning av antikroppar till pärlans yta gör Dynabeads Tosylaktiverad ett utmärkt val för Immunoprecipitation av proteiner och proteinkomplex (Co-Immunoprecipitation, Co-IP). Skonsam och snabb magnetisk koncentration av pärlorna och korta inkubationstider (möjligt på grund av snabb ytbaserad bindningskinetik) gör Dynabeads Tosylaktiverad ett utmärkt val för immunoutfällning av mycket labila eller och/eller övergående (kortlivade) proteinkomplex.

Bead Yta Egenskaper för Dynabeads Tosylaktiverad:
• p-toluen-sulfonyl (Tosyl) grupper
• Hydrofob, pH-neutral
• Kovalent bindning av primära amin (NH ₂ ) eller sulfhydryl (SH) grupper

Ultrasnabba protokoll:
• Identifiera medlemmar av proteinkomplex på minuter snarare än timmar
• Temporell upplösning tillräckligt kort för att identifiera övergående och labila komplex
• Identifiera bindande partners som inte kan identifieras med längre protokoll
• Snabba protokoll minskar den redan ultralåga bakgrundsbindningen ytterligare
• Starkare signal-brus-förhållanden

Tillämpningar:
• IP av proteiner och proteinkomplex
• Koppla funktionella enzymer till pärlytan för nedströmsanalyser
• Koppla peptider till pärlytan för att identifiera bindemedel

. Rena peptider, proteiner och enzymer som är:
• Övergående stabil
• Strukturellt intakt
• Temperaturlabil
• I deras ursprungliga konformation och funktionella

kopplingsprocedur beskrivs:
Kovalent koppling utförs över natten genom att inkubera den önskade liganden med Dynabeads Tosylaktiverad. Ligander som vanligtvis kopplas till Dynabeads Tosylaktiverade inkluderar peptider och proteiner (t.ex. antikroppar för Immunoprecipitation eller Co-Immunoprecipitation). Koppling sker vid neutralt till högt pH och vid 37 °C. Vi rekommenderar koppling vid pH 8,5-9,5, men för pH-labila ligander kan koppling utföras i en alternativ buffert vid pH 7,4.

Efter slutförandet av ligandkopplingssteget, den faktiska Dynabeads Tosylaktiverad ytbeläggning kommer att göras inert, vilket resulterar i låg ospecifik bindning.

Bindningskapacitet per milligram pärlor:
Varierar beroende på ligand, (t.ex. 14-19μ g IgG)

Om Dynabeads:
Dynabeads är icke-porösa monodispersa superparamagnetiska pärlor. De är mycket mobila i lösning, vilket gör det möjligt för ligander kopplade till pärlorna att kontinuerligt interagera med hela provvolymen. De superparamagnetiska pärlorna dras till rörväggarna genom att överföra röret till ett ställ som innehåller ett starkt magnetfält. Starka magnetfält drar snabbt pärlorna till rörväggen, vilket möjliggör enkel och fullständig borttagning av supernatanten med pipett. Tvättstegen utförs på liknande sätt.