Läs mer
Invitrogen™ Flp-In™ T-REx™ Core Kit
Beskrivning
Innehåller
pFRT/lacZeo: 20 μg, lyofiliserad i TE, pcDNA6/TR: 20 μg, lyofiliserad i TE, pOG44: 20 μg, lyofiliserad i TE, pcDNA5/FRT/TO: 20 μg, lyofiliserad i TE, pcDNA5/FRT/TO/CAT: 20 μg, lyofiliserad i TE, CMV Forward Primer (21-mer): 2 μg, lyofiliserad i TE, BGH Reverse Primer (18-mer): 2 μg, lyofiliserad i TE, Tetracyklin: 5g
- När Flp-InT-REx-värdcellinje som innehåller integrerat FRT-ställe har skapats, är efterföljande generering av Flp-InT-REx-cellinjer som uttrycker gener av intresse snabb och effektiv
- Tillåter generering av isogena, inducerbara stabila cellinjer
- Tillåter polyklonalt urval av stabila expressionscellinjer
- För att generera Flp-InT-REx värdcellinje för uttryck av gen, kommer först sekventiellt att transfektera däggdjurscellinje med pFRT/ lac Zeo och pcDNA6/TR, som båda integreras slumpmässigt och oberoende i värdgenomet
- Förra innehåller FRT-ställe (för homolog intermolekylär rekombination) strax nedströms från startkodonet i lacZ-Zeocin fusion
- Den senare uttrycker konstitutivt tetracyklinrepressorn, vilket gör det möjligt att reglera aktiviteten hos TetO 2 -promotorn
- Nästa steg i att generera inducerbar cellinje är att samtransfektera pOG44- och pcDNA5/FRT/TO-vektorerna, av vilka den senare innehåller en intressant gen under kontroll av tetracyklinreglerad CMV/ TetO2 -promotor, till värdcellinjen
- Homolog rekombination mellan FRT-ställen i pcDNA5/FRT/TO och på värdcellskromosomen, katalyserad av Flp-rekombinas uttryckt från pOG44, genererar derivatcellinjer i vilka genen har integrerats stabilt i värdcellskromosomen
- Dessa celler kan selekteras och underhållas med användning av hygromycin- och blasticicinresistens förvärvad som en följd av rekombinationshändelse
Däggdjursuttryck, proteinuttryck, proteiner, uttryck, isolering och analys, reglerat uttryck, målinriktad integration
Specifikationer
Specifikationer
| Konstitutivt eller inducerbart system | Inducerbar |
| Leveranstyp | Transfektion |
| Inducerande medel | Tetracyklin |
| Promotor | CMV/TO |
| Produkttyp | Flp-In Core Kit |
| Urvalsagent (eukaryot) | Zeocin™ , Blasticidin, Hygromycin |
| Innehåll och lagring | Varje kit innehåller följande komponenter: •pFRT/lacZeo: 20μ g, lyofiliserad i TE • pcDNA6/TR: 20μ g, lyofiliserad i TE • pOG44: 20μ g, lyofiliserad i TE • pcDNA5/FRT/TO: 20μ g, lyofiliserad i TE • pcDNA5/FRT/TO/CAT: 20μ g, lyofiliserad i TE • CMV Forward Primer (21-mer): 2μ g, lyofiliserad i TE • BGH Reverse Primer (18-mer): 2μ g, lyofiliserad i TE • Tetracyklin: 5 g Satsen skickas i rumstemperatur. Förvara vektorer och primrar vid -20 °C. Förvara tetracyklin vid 4 °C, skyddat från ljus. |
| Protein Tag | Otaggad |
| Kloningsmetod | Restriktionsenzym/MCS |
| Kvantitet | 1 kit |
| Visa mer |
Endast för forskning. Ej för diagnostik.
Genom att klicka på Skicka bekräftar du att du kan bli kontaktad av Fisher Scientific angående feedbacken du har lämnat i detta formulär. Vi kommer inte att dela din information för andra ändamål. All kontaktinformation som tillhandahålls ska också underhållas i enlighet med vår Sekretesspolicy.