Läs mer
Invitrogen™ GeneRacer™ Kit med SuperScript™ III RT och TOPO TA Cloning™ Kit för sekvensering
Beskrivning
De GeneRacer Kit tillhandahåller en metod för att erhålla fullängds 5'- och 3'-ändar av cDNA med användning av känd cDNA-sekvens från uttryckta sekvenstaggar (EST), subtraherad cDNA, differentiell visning eller biblioteksscreening. RACE PCR-produkter kan snabbt och enkelt klonas med antingen Zero Blunt TOPO PCR-kloningskit för sekvensering (PCR-produkter med trubbiga ändar) eller TOPO TA Cloning för Sequencing Kit (PCR-produkter med 3' A-överhäng). Med hjälp av de tillhandahållna protokollen kan cDNA-ändarna av sällsynta (30 kopior/cell) och långa (9 kb) transkript amplifieras och sekvenseras från 1 μg totalt RNA.
- Generera cDNA från transkript som är minst 10 kb långa
- Få fullängds 5'-ände av sällsynta transkript med färre än 30 kopior per cell
- Klona 5'- och 3'-ändar av full längd för att konstruera komplett cDNA-sekvens
Kloning, PCR och realtids-PCR, omvänd transkription, cDNA-bibliotek och bibliotekskonstruktion
Beställningsinfo
Fraktsätt: Torr is
Specifikationer
Specifikationer
| Bakterie- eller jäststam | TOP10 |
| Kloningsmetod | TOPO TA |
| Innehåll och lagring | Lagra varje modul enligt anvisningarna: GeneRacer™ Modul (-°20 C): • 2x 1,5 ml sterilt vatten • 24μ l RNaseOut™ • 6μ l varje kalvtarmfosfatas (CIP), CIP-buffert, tobakssyrapyrofosfatas (TAP), 10X TAP-buffert, T4 RNA-ligas, 10X T4 RNA-ligasbuffert och 10 mM ATP • 6x 250 ng GeneRacer™ RNA Oligo • 2x 1 ml fenol/kloroform • 36μ l Musselglykogen • 200μ l Natriumacetat (3 M) • 225μ l vardera GeneRacer™ 5′ Primer, 5′ Kapslad Primer, 3′ Primer och 3′ Kapslad Primer • 20μ l Kontroll HeLa Total RNA (500 ng/μ l) • 15μ l varje kontrollprimer A och kontrollprimer B.1 SuperScript™ III RT-modul (-20 °C) • 6μ l SuperScript™ III Omvänd Transcriptase (200 U/μ l) • 24μ l 5X First Strand Buffer • 15μ l DTT (0,1 M) • 6μ l RNaseH (2 U/μ l) • 6μ l Random Primers (100 ng/μ l) • 6μ l GeneRacer™ Oligo dT Primer (900 ng/μ l) • 6μ l dNTP-mix (10 mM vardera) 10 S.N.A.P.™ Kolumner (rumstemperatur) TOPO TA Cloning™ Kit för sekvensering (-20 °C) • Tillräckligt med reagens och en Shot™ TOP10 Kemiskt kompetent E. coli (förvaras vid -80 °C) för att klona 10 GeneRacer™ PCR-produkter; GeneRacer Modul (-°20 C), SuperScript III RT-modul (-°20 C), Kompetent E. coli (lagra vid -°80 C), S.N.A.P. Kolumner (rumstemperatur), TOPO TA Cloning Kit för sekvensering (-20 °C) |
| Formatera | Sats |
| För användning med (applikation) | Omvänd transkription |
| Inkluderar | GeneRacer Modul: 2 x 1,5 ml sterilt vatten, μ24 L μRNaseOut, 6 L vardera kalvtarmfosfatas (CIP), CIP-buffert, tobakssyrapyrofosfatas (TAP), 10X TAP-buffert, T4 RNA-ligas, 10X T4 RNA-ligasbuffert och 10 mM ATP , 6 x 250 ng GeneRacer RNA Oligo , 2 x 1 ml fenol/kloroform, 36 μl musselglykogen, 200 μl natriumacetat (3M ), 225 L μvardera GeneRacer 5' Primer, 5' Kapslad Primer, 3' Primer och 3' Kapslad primer, 20 μL kontroll HeLa Total RNA (500ng/μ L), μ15 L vardera kontrollprimer A och kontrollprimer B.1; SuperScript III RT-modul: 6 μL SuperScript III omvänd Transcriptase (200U/μ L), 24 μL 5X First Strand Buffer, 15 μL DTT (0,1 M), 6 μL RNaseH (2U/μ L), 6 μL Random Primers (100ng/μ L), 6 μL GeneRacer Oligo dT Primer (900ng/μ L), 6 μL dNTP-blandning (10 mM vardera), 10 S.N.A.P. Kolumner, TOPO TA Cloning Kit för sekvensering (-20 C), °Tillräckligt med reagens och One Shot TOP10 Kemiskt kompetent E. coli |
| Produktlinje | Generacer™ , SuperScript™ , TA Cloning™ , TOPO™ |
| Produkttyp | Kloningssats |
| Kvantitet | 1 Kit |
| Vektor | pCR4-TOPO TA |
Endast för forskning. Ej för diagnostik.
Din input är viktig för oss. Fyll i det här formuläret för att ge feedback relaterad till innehållet på denna produkt.