Invitrogen™ En Shot™ BL21(DE3)pLysS kemiskt kompetent E. coli

One Shot BL21(DE3)pLysS kemiskt kompetenta E. coli -celler är idealiska för användning med bakteriofag T7-promotorbaserade expressionssystem som pRSET och pET. pLysS-plasmiden som bärs av BL21(DE3) pLysS-stammen producerar T7-lysozym, en hämmare av T7-RNA-polymeras, för att reducera basalnivåexpression av genen av intresse. pLysS ger resistens mot kloramfenikol (CamR) och innehåller p15A-ursprunget. Detta ursprung tillåter pLysS att vara kompatibel med plasmider som innehåller ColE1- eller pMB1-ursprunget (dvs pUC- eller pBR322-härledda plasmider). Rekombinanta proteiner som är icke-toxiska för E. coli uttrycks i allmänhet i högre nivåer i BL21(DE3)-celler jämfört med BL21(DE3) pLysS-stammen med strängare uttryckskontroll. BL21(DE3)pLysS rekommenderas för användning vid uttryck av toxiska gener.

BL21 (DE3) E. coli -stammen är en av de mest populära värdstammarna för att producera rekombinanta proteiner. Denna stam hade konstruerats för att bäraλ DE3-lysogen som innehåller T7 RNA-polymerasgenen under kontroll av lac UV5-promotorn. IPTG krävs för att inducera uttryck av T7-RNA-polymeraskaskadsystemet som i sin tur transkriberar T7-promotorreglerad målgen.

BL21(DE3) är ett derivat från E. coli B-stammen som inte innehåller jonproteaset och som även har brist på det yttre membranproteaset OmpT. Avsaknaden av två viktiga proteaser minskar nedbrytningen av heterologa proteiner som uttrycks i stammarna. Dessutom gör flera andra stamegenskaper dem speciellt lämpade för proteinproduktion, nämligen snabb tillväxt i minimalt medium, en lägre acetatproduktion när de odlas i högt glukosmedium och en förmåga att nå hög celldensitet. One Shot BL21(DE3)pLysS kemiskt kompetenta E. coli -celler kan uppnå transformationseffektivitet på> 1 x 10 ⁸ cfu/μ g kontroll-DNA.

One Shot BL21(DE3)pLysS kemiskt kompetenta E. coli - celler erbjuder:
• Omvandlingseffektivitet av> 1 x 10 ⁸ cfu/μ g kontrollplasmid-DNA
• Jon- och OmpT-proteasbrist som minskar nedbrytningen av rekombinant protein
• IPTG-inducerbar lac UV5-promotor som kontrollerar uttrycket av T7 RNA-polymeraset
• pLysS (CamR) plasmid för reducerat basalt uttryck i oinducerade celler
•hsd S-mutation som möjliggör effektiv transformation av ometylerat DNA
• Snabb tillväxt i minimalt medium och förmåga att nå hög

celldensitet Enkelt att använda One Shot-format
BL21(DE3)pLysS Kemiskt kompetenta E. coli -celler levereras i det bekväma, enreaktionsformatet One Shot. Engångsformatet med ett rör gör att alla steg i transformationsprotokollet, upp till plätering, kan ske i samma rör, vilket hjälper till att spara tid och förhindra kontaminering.

Genotyp F
^– omp T hsd SB (r _B , m –_B ) –gal dcm (DE3) pLysS(CamR)

Hitta den stam och det format du behöver
• Vi erbjuder andra E. coli -stammar för proteinuttryck.
• För uttryck av toxiska proteiner, överväg BL21 AI One Shot kemiskt kompetent E. coli (kat. nr. C607003).
• BL21 Star (DE3) och andra stammar finns i MultiShot format för applikationer med hög genomströmning.
• Vi erbjuder en mängd olika system för uttryck av rekombinanta proteiner i E. coli. Champion pET-expressionssystemet ger den högsta nivån av proteinproduktion som finns tillgänglig i alla expressionssystem.