Invitrogen™ En Shot™ INV110 Kemiskt kompetent E. coli

One Shot INV110 kemiskt kompetenta E. coli -celler härrör från JM110-stammen och är specifikt designade för tillväxt och rening av plasmid-DNA som kommer att spjälkas med dam- eller dcm -metyleringskänsliga restriktionsenzymer. Dam- och dcm -bristen möjliggör produktion av plasmid-DNA som är ometylerat vid GmATC- och CmC(A/T)GG-ställen. INV110 kemiskt kompetenta celler kan uppnå en transformationseffektivitet på> 1 x 10 ⁶ cfu/μ g kontroll-DNA.

INV110-stammen är en betydande förbättring jämfört med JM110-stammen. INV110-stammen har konstruerats för att bära en änd -A1-mutation, som eliminerar det ospecifika endonukleas I, för förbättrad plasmid-DNA-beredning. Mutation i det metyleringsberoende restriktionssystemetΔ ( mcr C- mrr ) tillåter transformation av genomiskt DNA. Denna stam har också genotypen lac ΔZ M15, vilket ger möjlighet till blå-vit screening på plattor som innehåller antingen X-Gal eller Bluo-Gal. INV110-stammen innehåller en F´ episom som kan stödja kloningsplasmider med ett fl-liknande replikationsursprung (fagmider) och tillåter isolering av enkelsträngat DNA (ssDNA). Dessutom har F´ episom bär lac Iq-repressorn för inducerbart uttryck från trc- , tac- och lac- promotorer med användning av IPTG.

One Shot INV110 kemiskt kompetent E. coli -erbjudande:
• Transformationseffektiviteter av> 1 x 10 ⁶ cfu/μ g
•dam- och dcm -brist för att tillåta restriktionssmältning med dam- och dcm-känsliga restriktionsenzymer
• Stabil F´ episom som tillåter isolering av ssDNA och bär lac Iq-repressor för inducerbart uttryck från trc- , tac- och lac- promotorer
•Δ ( mcr C- mrr ) mutation som minskar klyvning av främmande metylerat DNA och förbättrar transformation av genomiskt DNA
•lac Z ΔM15 för blå-vit färgscreening av rekombinanta kloner
•ände A1 för renare DNA-preparat och bättre resultat i nedströmsapplikationer på grund av eliminering av ospecifik nedbrytning av endonukleas I
• Tn10 för att tillåta val av värdstammen med tetracyklin

Obs: damdeletion resulterar i högre mutationshastighet, högre rekombinationsfrekvens och lägre viabilitet på plattor. Undvik att plocka kolonier som är märkbart större än resten av befolkningen (potentiella revertanter). Välj kolonier och isolera DNA:t inom en dag efter transformation.

Bekvämt och effektivt format
One Shot INV110 kemiskt kompetenta E. coli -celler levereras i det bekväma enreaktionsformatet One Shot. Varje rör innehåller tillräckligt med celler för en transformation, vilket minskar både frys-upptiningscykler och kostnader förknippade med oanvända celler.

Genotyp
´F [ tra D36 proABlac Iq lac ΔZ M15] rps L (StrR) thr leu end A thi -1 lac Y gal K gal T ara ton A tsx dam dcm sup E44Δ ( lac - proAB )Δ ( mcr C- mrr )102:: Tn 10(TetR)

Hitta den belastning och det format som passar dina behov
• Vi erbjuder andra stammar i kemiskt kompetenta och elektrokompetenta cellformat för att möta dina specifika behov.
• Tränar in MultiShot format för högkapacitetstillämpningar är tillgängliga.
• Alternativa stammar för ssDNA-produktion är tillgängliga, såsom TOP10F´ (Kat. Nr. C303003) eller elektrokompetent DH12S (Kat. Nr. 18312017).
• Utforska restriktionsenzymdetaljer för att hitta metyleringskänslighet.