Läs mer
Invitrogen™ SuperScript™ III First-Strand Synthesis-system
Beskrivning
Innehåller
Oligo(dT) 20 (50 μM), 50 μl; Random hexamers (50ng/μl), 250 μl; 10X RT-buffert, 1 ml; 0,1 M DTT, 250 μL; 25 mM magnesiumklorid, 500 μ1; 10 mM dNTP-blandning, 250 μL; SuperScript III RT (200U/μl), 50 μl; RNaseOUT (40U/μl), 100 μl; E. coli RNas H (2U/μl), 50 μl; DEPC-behandlat vatten, 1,2 ml; Totalt HeLa RNA (10ng/μl), 20 μl; Sense Control Primer (10 μM), 25 μL; Antisense Control Primer (10 μM), 25 μl
SuperScript III First-String Synthesis System för RT-PCR är optimerat för att syntetisera förstasträngens cDNA från renat poly(A)+ eller totalt RNA. RNA-mål från 100 bp till >12 kb kan detekteras med detta system och mängden startmaterial kan variera från 1 pg till 5 μg av totalt RNA. SuperScript III Reverse Transcriptase är en version av M-MLV RT som har konstruerats för att minska RNas H-aktivitet och ge ökad termisk stabilitet. Enzymet används för att syntetisera cDNA vid ett temperaturintervall på 42 ––55 °C, vilket ger ökad specificitet, högre avkastning av cDNA och mer fulllängdsprodukt än andra omvända transkriptaser. Eftersom SuperScript III RT inte hämmas signifikant av ribosomalt och transfer-RNA kan det användas för att syntetisera första strängens cDNA från en total RNA-preparat.
Användning av SuperScript III First-Strand System
cDNA-syntes utförs i första steget med antingen total RNA eller poly(A)+-selekterat RNA primat med oligo(dT), slumpmässiga primers eller en genspecifik primer. I det andra steget utförs PCR i ett separat rör med primers specifika för den genen av intresse. För PCR-reaktionen rekommenderar vi en av följande DNA-polymeraser: Platinum Taq DNA Polymerase ger automatiska hotstart-förhållanden för ökad specificitet upp till 4 kb, Platinum Taq DNA Polymerase High Fidelity ger ökad utbyte och hög fidelitet för mål upp till 15 kb, och Platinum Pfx DNA Polymeras ger maximal trohet för mål upp till 12 kb.
Beställningsinfo
Fraktsätt: Torr is
Specifikationer
Specifikationer
| Innehåll och lagring | • Oligo(dT)20, 50 μL (50 μM) • Random hexamers, 250 μL (50 ng/μL) • 10X RT buffer, 1 mL • DTT, 250 μL (0.1 M) • Magnesium chloride, 500 μL (25 mM) • dNTP mix, 250 μL (10 mM) • SuperScript III RT, 50 μL (200 U/μL) • RNaseOUT, 100 μL (40 U/μL) • E. coli RNas H, 50 μL (2 U/μL) • DEPC-treated water, 1.2 mL • Total HeLa RNA, 20 μL (10 ng/μL) • Sense Control Primer, 25 μL (10 μM) • Antisense Control Primer, 25 μL (10 μM) Store at –20°C. |
| Formatera | Sats |
| GC-rik PCR-prestanda | Hög |
| Reaktionshastighet | 50/50 |
| Teknik | Omvänd transkription |
| Optimal reaktionstemperatur | 50 °C |
| Kvantitet | 50 rxns |
| Omvänt transkriptas | SuperScript III |
| Frakt skick | Torr is |
| För användning med (applikation) | Realtids-PCR (qPCR), RT-PCR |
| Visa mer |
Endast för forskning. Ej för diagnostik.
Genom att klicka på Skicka bekräftar du att du kan bli kontaktad av Fisher Scientific angående feedbacken du har lämnat i detta formulär. Vi kommer inte att dela din information för andra ändamål. All kontaktinformation som tillhandahålls ska också underhållas i enlighet med vår Sekretesspolicy.