Läs mer
Invitrogen™ SuperScript™ III First-Strand Synthesis-system
Beskrivning
Innehåller
Oligo(dT) 20 (50 μM), 50 μl; Random hexamers (50ng/μl), 250 μl; 10X RT-buffert, 1 ml; 0,1 M DTT, 250 μL; 25 mM magnesiumklorid, 500 μ1; 10 mM dNTP-blandning, 250 μL; SuperScript III RT (200U/μl), 50 μl; RNaseOUT (40U/μl), 100 μl; E. coli RNas H (2U/μl), 50 μl; DEPC-behandlat vatten, 1,2 ml; Totalt HeLa RNA (10ng/μl), 20 μl; Sense Control Primer (10 μM), 25 μL; Antisense Control Primer (10 μM), 25 μl
SuperScript III First-Strand Synthesis-system för RT-PCR är optimerat för att syntetisera förstasträngs-cDNA från renat poly(A) + eller totalt RNA. RNA-mål från 100 bp till > 12 kb kan detekteras med detta system och mängden utgångsmaterial kan variera från 1 pg till 5 μg av totalt RNA. SuperScript III omvänt transkriptas är en version av M-MLV RT som har konstruerats för att minska RNas H-aktivitet och ge ökad termisk stabilitet. Enzymet används för att syntetisera cDNA vid ett temperaturområde på 42 –55°C, vilket ger ökad specificitet, högre utbyten av cDNA och mer fullängdsprodukt än andra omvända transkriptaser. Eftersom SuperScript III RT inte signifikant hämmas av ribosomalt och överförings-RNA, kan det användas för att syntetisera förstasträngs-cDNA från ett totalt RNA-preparat.
Med användning av SuperScript III First-Strand-system
utförs cDNA-syntes i det första steget med användning av antingen totalt RNA eller poly(A) + -selekterat RNA primat med oligo(dT), slumpmässiga primrar eller en genspecifik primer. I det andra steget utförs PCR i ett separat rör med hjälp av primers som är specifika för den aktuella genen. För PCR-reaktionen rekommenderar vi ett av följande DNA-polymeraser: Platinum Taq DNA-polymeras ger automatiska varmstarts-förhållanden för ökad specificitet upp till 4 kb, Platinum Taq DNA-polymeras High Fidelity ger ökad utbyte och high fidelity för mål upp till 15 kb, och Platinum Pfx DNA-polymeras ger maximal trohet för mål upp till 12 kb.
Beställningsinfo
Fraktsätt: Torr is
Specifikationer
Specifikationer
| Innehåll och lagring | • Oligo(dT)20, 50 μL (50 μM) • Random hexamers, 250 μL (50 ng/μL) • 10X RT buffer, 1 mL • DTT, 250 μL (0.1 M) • Magnesium chloride, 500 μL (25 mM) • dNTP mix, 250 μL (10 mM) • SuperScript III RT, 50 μL (200 U/μL) • RNaseOUT, 100 μL (40 U/μL) • E. coli RNas H, 50 μL (2 U/μL) • DEPC-treated water, 1.2 mL • Total HeLa RNA, 20 μL (10 ng/μL) • Sense Control Primer, 25 μL (10 μM) • Antisense Control Primer, 25 μL (10 μM) Store at –20°C. |
| Formatera | Sats |
| GC-rik PCR-prestanda | Hög |
| Reaktionshastighet | 50/50 |
| Teknik | Omvänd transkription |
| Optimal reaktionstemperatur | 50 °C |
| Kvantitet | 50 rxns |
| Omvänt transkriptas | SuperScript III |
| Frakt skick | Torr is |
| För användning med (applikation) | Realtids-PCR (qPCR), RT-PCR |
| Visa mer |
Endast för forskning. Ej för diagnostik.
Din input är viktig för oss. Fyll i det här formuläret för att ge feedback relaterad till innehållet på denna produkt.