Invitrogen™ TOPO™ TA Cloning™ Kit för sekvensering, med en Shot™ Mach1™ T1 fagresistent kemiskt kompetent E. coli

Dessa kit innehåller allt som behövs för att klona och välja rekombinanta vektorer som innehåller ditt valda PCR-fragment. Varje kit använder pCR™4-TOPO TA-vektor med specialdesignade sekvenseringsprimerställen som returnerar mer insatt sekvens och mindre vektorsekvens från varje reaktion.
pCR4-TOPO TA vektor : Optimerad för sekvensering
Vi har tagit bort mycket av det multipla kloningsstället från pCR4-TOPO TA-vektorn för att förkorta avståndet mellan sekvenseringsprimerställen och insättningsstället till så lite som 33 bp. Detta innebär att sekvenseringsreaktioner ger mindre vektorsekvens och mer infogningssekvens. pCR4-TOPO TA-vektorn har platser för fyra vanliga sekvenseringsprimrar: M13 framåt, M13 bakåt, T7 och T3 . Satsen innehåller en alikvot av varje.
pCR4-TOPO TA klonselektion och manipulation.
pCR4-TOPO; TA-vektor innehåller både ampicillin- och kanamycinresistensmarkörer och en LacZα -ccdB genfusion för positiv selektion och blå/vit screening. Vektorns minimerade multipla kloningsställe inkluderar fortfarande flankerande EcoRI-ställen för förenklad excision av klonade PCR-produkter och ett unikt Sse8387I-ställe för generering av kapslade deletioner före sekvensering. T7 och T3 promotorer är också närvarande för in vitro-transkription.
Förenklad TOPO-baserad kloning
TOPO kloningsteknologi, det finns inget behov av PCR-primrar som innehåller specifika sekvenser, post-PCR procedurer, vektorpreparering eller andra tidsintensiva DNA-manipulationssteg. Lägg bara till din PCR-reaktion direkt till den medföljande topoisomerasladdade vektorn, inkubera 5 minuter och transformera med de medföljande E. coli- kompetenta cellerna.
Effektiv kloning
Med upp till 95 % av klonerna som bär det önskade inlägget kan du screena färre kloner för att spara tid och pengar. pCR4-TOPO TA-vektorn som används i detta kit kommer med 3'T överhäng för effektiv ligering avTaq -förstärkta PCR-produkter med 3'A överhäng.
Standarden inom kloning
När det gäller kloning, TOPO™ kloningsteknik har varit en pålitlig partner för tusentals forskare i över tio år. Snabb, enkel att använda och effektiv, TOPO™ kloning har tillämpats på många olika vektorer för ett brett spektrum av tillämpningar.
TOPO TA Cloning Kit för sekvensering Kit-
alternativ The TOPO TA Cloning Kit för sekvensering kan köpas med en mängd olika kompetenta celler som ger olika fördelar beroende på dina behov:

• Allmän kloning: TOP10 (Kat. nr. K4575-J10, K4575-01, K4575-40)
• Högeffektiv kloning: TOP10 Electrocomp™ Celler (kat.nr. K4580-01, K4580-40)
• Allmän kloning, bakteriofag T1-resistens: DH5α -T1R (kat.nr. K4595-01, K4595-40)
• Snabb tillväxt: Mach1™ -T1R kemiskt kompetent E. Coli (kat. nr. K4530-20)

• Få mer sekvens: Tillåter mer infogningssekvens och mindre vektorsekvens vid användning av standardsekvenseringsprimrar
• Snabbt och enkelt: Gå från PCR-till-kloner i bara tre steg och på så lite som 5 minuters praktisk tid
• Effektiv: Uppnå upp till 95 % kloner med korrekt infogning
• Beprövad: Pålitlig prestanda i över ett decennium med över 4000 citeringar

• VEKTOR: pCR4-TOPO TA vektor : Optimerad kloningsvektor för förbättrade sekvenseringsresultat
• Kloningsmetod: TOPO TA Cloning : Topoisomeras I-baserad 5 minuters ligering av PCR-produkter med 3'A överhäng (Taq -förstärkt) till vektorn
• Kompetenta celler: Olika alternativ : Välj från kit med antingen allmänna, högeffektiva, bakteriofag T1-resistenta eller snabbväxande kompetenta celler

Kromatinbiologi, kromatinimmunutfällning (ChIP), kloning, metyleringsanalys, PCR-kloning, RNAi, epigenetik och icke-kodande RNA-forskning, sekvensering av bisulfitbehandlat DNA