Invitrogen™ TOPO™ TA Cloning™ Kit för sekvensering, med en Shot™ TOP10 Electrocomp™E. coli

Varje kit använder pCR™4-TOPO™ TA-vektor med specialdesignade sekvenseringsprimerställen som returnerar mer insatt sekvens och mindre vektorsekvens från varje reaktion. Kitet innehåller allt som behövs för att klona och välja rekombinanta vektorer som innehåller ditt valda PCR-fragment.
pCR4-TOPO TA vektor : Optimerad för sekvensering
Vi har tagit bort mycket av det multipla kloningsstället från pCR4-TOPO TA-vektorn för att förkorta avståndet mellan sekvenseringsprimerställen och insättningsstället till så lite som 33 bp. Detta innebär att sekvenseringsreaktioner ger mindre vektorsekvens och mer infogningssekvens. pCR4-TOPO TA-vektorn har platser för fyra vanliga sekvenseringsprimrar: M13 framåt, M13 bakåt, T7 och T3 . Satsen innehåller en alikvot av varje.
pCR4-TOPO TA klonselektion och manipulation
PCR4-TOPO TA-vektorn innehåller både ampicillin- och kanamycinresistensmarkörer och en LacZα -ccdB genfusion för positiv selektion och blå/vit screening. Vektorns minimerade multipla kloningsställe inkluderar fortfarande flankerande EcoRI-ställen för förenklad excision av klonade PCR-produkter och ett unikt Sse8387I-ställe för generering av kapslade deletioner före sekvensering. T7 och T3 promotorer är också närvarande för in vitro-transkription.
Förenklad TOPO-baserad kloning
TOPO kloningsteknologi, det finns inget behov av PCR-primrar som innehåller specifika sekvenser, post-PCR procedurer, vektorpreparering eller andra tidsintensiva DNA-manipulationssteg. Lägg bara till din PCR-reaktion direkt till den medföljande topoisomerasladdade vektorn, inkubera 5 minuter och transformera med de medföljande E. coli- kompetenta cellerna.
Effektiv kloning
Med upp till 95 % av klonerna som bär det önskade inlägget kan du screena färre kloner för att spara tid och pengar. pCR4-TOPO TA-vektorn som används i detta kit kommer med 3'T överhäng för effektiv ligering avTaq -förstärkta PCR-produkter med 3'A överhäng.
Standarden inom kloning
När det gäller kloning, TOPO™ kloningsteknik har varit en pålitlig partner för tusentals forskare i över tio år. Snabb, enkel att använda och effektiv, TOPO™ kloning har tillämpats på många olika vektorer för ett brett spektrum av tillämpningar.
TOPO TA Cloning Kit för sekvensering Kit-
alternativ The TOPO TA Cloning Kit för sekvensering kan köpas med en mängd olika kompetenta celler som ger olika fördelar beroende på dina behov:

• Allmän kloning: TOP10 (Kat. nr. K4575-J10, K4575-01, K4575-40)
• Högeffektiv kloning: TOP10 Electrocomp™ Celler (kat. nr. K4580-01, K4580-40)
• Allmän kloning, bakteriofag T1-resistens: DH5α -T1R (kat. nr. K4595-01, K4595-40)
• Snabb tillväxt: Mach1™ -T1R kemiskt kompetent E. Coli (kat. nr. K4530-20)

• Få mer sekvens: Tillåter mer infogningssekvens och mindre vektorsekvens vid användning av standardsekvenseringsprimrar
• Snabbt och enkelt: Gå från PCR-till-kloner i bara tre steg och på så lite som 5 minuters praktisk tid
• Effektiv: Uppnå upp till 95 % kloner med korrekt infogning
• Beprövad: Pålitlig prestanda i över ett decennium med över 4000 citeringar
• VEKTOR: pCR4-TOPO TA vektor: Optimerad kloningsvektor för förbättrade sekvenseringsresultat
• KLONINGSMETOD: TOPO TA-kloning: Topoisomeras I-baserad 5 minuters ligering av PCR-produkter med 3'A överhäng (Taq -förstärkt) till vektorn
• KOMPETENTA CELLER: Olika alternativ: Välj från kit med antingen allmänna, högeffektiva, bakteriofag T1-resistenta eller snabbväxande kompetenta celler

Kromatinbiologi, kromatinimmunutfällning (ChIP), kloning, metyleringsanalys, PCR-kloning, RNAi, epigenetik och icke-kodande RNA-forskning, sekvensering av bisulfitbehandlat DNA