Invitrogen™ TOPO™ TA Cloning™ Kit för sekvensering, med pCR™4-TOPO™ Vektor, en Shot™ TOP10 Kemiskt kompetent E. coli , och PureLink™ Quick Plasmid Miniprep Kit

De TOPO™ TA Cloning™ Kit för sekvensering använder pCR™4-TOPO™ TA-vektor med specialdesignade sekvenseringsprimerställen som returnerar mer insatt sekvens och mindre vektorsekvens från varje reaktion. Dessa kit inkluderar allt som behövs för att klona och selektera rekombinanta vektorer som innehåller det valda PCR-fragmentet.

• Få mer sekvens— Gör det möjligt för mer infogningssekvens och mindre vektorsekvens vid användning av standardsekvenseringsprimrar
• Snabbt och enkelt— Gå från PCR-till-kloner i bara 3 steg och på så lite som 5 minuter praktisk tid
• Effektiv— Uppnå upp till 95 % kloner med korrekt infogning
• Beprövad— pålitlig prestanda i över ett decennium med över 4000 citeringar

TOPO™ TA Cloning™ Kit för sekvensering Kit Översikt

• VEKTOR: pCR™4-TOPO™ TA Vector —Optimerad kloningsvektor för förbättrade sekvenseringsresultat
• KLONINGSMETOD: TOPO™ TA Cloning— Topoisomeras I-baserad 5 minuters ligering av PCR-produkter med ´3 A överhäng (Taq -förstärkt) till vektorn
• KOMPETENTA CELLER: Olika alternativ —Välj bland kit med antingen allmänna, högeffektiva, bakteriofag T1-resistenta eller snabbväxande kompetenta celler

pCR™4-TOPO™ TA Vector—optimerad för sekvensering
Mycket av de multipla kloningsställena från pCR™4-TOPO™ TA-vektor har tagits bort för att förkorta avståndet mellan sekvenseringsprimerställen och insättningsstället till så lite som 33 bp. Detta innebär att sekvenseringsreaktioner ger mindre vektorsekvens och mer infogningssekvens. De pCR™4-TOPO™ TA-vektor har platser för 4 vanliga sekvenseringsprimrar: M13 framåt, M13 bakåt, T7 och T3 . Satsen innehåller en alikvot av varje.

pCR™4-TOPO™ TA Clone Selection and Manipulation The
pCR™4-TOPO™ TA-vektor innehåller både ampicillin- och kanamycinresistensmarkörer och en LacZα -ccdB genfusion för positiv selektion och blå/vit screening. Vektorns ’minimerade multipla kloningsställe inkluderar fortfarande flankerande EcoRI-ställen för förenklad excision av klonade PCR-produkter och ett unikt Sse8387I-ställe för generering av kapslade deletioner före sekvensering. T7 och T3 promotorer är också närvarande för in vitro- transkription.

Förenklad TOPO™ -Baserad kloning med hjälp av
TOPO™ kloningsteknologi, det finns inget behov av PCR-primrar som innehåller specifika sekvenser, post-PCR procedurer, vektorpreparering eller andra tidsintensiva DNA-manipulationssteg. Lägg bara till din PCR-reaktion direkt till den medföljande topoisomerasladdade vektorn, inkubera 5 minuter och transformera med de medföljande E. coli- kompetenta cellerna.

Effektiv kloning
Med upp till 95 % av klonerna som bär det önskade inlägget kan du screena färre kloner för att spara tid och pengar. De pCR™4-TOPO™ TA-vektor som används i detta kit kommer med ´3 T överhäng för effektiv ligering avTaq -förstärkta PCR-produkter med 3 ´A överhäng.

Standarden inom kloning När
det gäller kloning, TOPO™ kloningsteknik har varit en pålitlig partner för tusentals forskare i över tio år. Snabb, enkel att använda och effektiv, TOPO™ kloning har tillämpats på många olika vektorer för ett brett spektrum av tillämpningar. De TOPO™ TA Cloning™ Kit för sekvensering kan köpas med en mängd olika kompetenta celler som ger olika fördelar beroende på dina behov.