Invitrogen™ TOPO™ TA Cloning™ Kit för sekvensering, utan kompetenta celler

Varje kit använder pCR™4-TOPO TA-vektor med specialdesignade sekvenseringsprimerställen som returnerar mer infogningssekvens och mindre vektorsekvens från varje reaktion, och är tillgängliga med en mängd olika kompetenta celler, eller inga kompetenta celler, beroende på dina behov och budget. Dessa kit innehåller allt som behövs för att klona och välja rekombinanta vektorer som innehåller ditt valda PCR-fragment.

TOPO TA Cloning Kit för sekvensering: översiktsvektor
: pCR4-TOPO TA-vektor: optimerad kloningsvektor för förbättrade
sekvenseringsresultat Kloningsmetod: TOPO™ TA Kloning™ : Topoisomeras –I-baserad, 5-minuters ligering av PCR-produkter med 3'A överhäng (Taq -förstärkt) till vektorkompetenta
celler: Olika alternativ: välj från kit med generella, högeffektiva, bakteriofag T1-resistenta eller snabbväxande kompetenta celler, eller använd din egen
pCR4-TOPO TA-vektor : optimerad för sekvensering
Vi har tagit bort mycket av det multipla kloningsstället från pCR4-TOPO TA-vektorn för att förkorta avståndet mellan sekvenseringsprimerställena och infogningsstället till så lite som 33 bp. Detta innebär att sekvenseringsreaktioner ger mindre vektorsekvens och mer infogningssekvens. pCR4-TOPO TA-vektorn har platser för 4 vanliga sekvenseringsprimrar: M13 framåt, M13 bakåt, T7 och T3 . Satsen innehåller en alikvot av varje.
pCR4-TOPO TA klonselektion och manipulation
PCR4-TOPO TA-vektorn innehåller både ampicillin- och kanamycinresistensmarkörer och en LacZα -ccdB genfusion för positiv selektion och blå/vit screening. Vektorns minimerade multipla kloningsställe inkluderar fortfarande flankerande EcoRI-ställen för förenklad excision av klonade PCR-produkter och ett unikt Sse8387I-ställe för generering av kapslade deletioner före sekvensering. T7 och T3 promotorer är också närvarande för in vitro-transkription.
Förenklad TOPO-baserad kloning
med hjälp av TOPO kloningsteknologi, det finns inget behov av PCR-primrar som innehåller specifika sekvenser, post-PCR procedurer, vektorpreparering eller andra tidsintensiva DNA-manipulationssteg. Lägg bara till din PCR-reaktion direkt till den medföljande topoisomerasladdade vektorn, inkubera 5 minuter och transformera med de medföljande E. coli- kompetenta cellerna.
Effektiv kloning
Med upp till 95 % av klonerna som bär det önskade inlägget kan du screena färre kloner och spara tid och pengar. pCR4-TOPO TA-vektorn som används i detta kit kommer med 3'T överhäng för effektiv ligering avTaq -förstärkta PCR-produkter, som innehåller 3'A-överhäng.
Standarden inom kloning
När det gäller kloning, TOPO kloningsteknik har varit en pålitlig partner för tusentals forskare i över tio år. Snabb, enkel att använda och effektiv, TOPO kloning har tillämpats på många olika vektorer för ett brett spektrum av tillämpningar.
TOPO TA Cloning Kit för sekvensering: kit
alternativ Den TOPO TA Cloning Kit för sekvensering kan köpas med en mängd olika kompetenta celler som ger olika fördelar beroende på dina behov:

• Allmän kloning: TOP10 (Kat. nr. K4575-J10, K4575-01, K4575-40)
• Högeffektiv kloning: TOP10 Electrocomp™ Celler (kat. nr. K4580-01, K4580-40)
• Allmän kloning, bakteriofag T1-resistens: DH5α -T1R (kat. nr. K4595-01, K4595-40)
• Snabb tillväxt: Mach1™ -T1R kemiskt kompetent E. Coli (kat. nr. K4530-20)
• Tillhandahåll din egen: för flexibilitet och för att spara pengar (kat.nr. 450030)

En version av satsen som innehåller en PureLink™ Quick Plasmid Miniprep Kit (kat. nr. K4575-02) för användning i isolering av ren, sekvenseringsfärdig, rekombinant plasmid finns också tillgänglig.

• Resistent mot Ampicillin (AmpR) och Kanamycin (KanR)
• Få mer sekvens: möjliggör mer infogningssekvens och mindre vektorsekvens vid användning av standardsekvenseringsprimrar
• Snabbt och enkelt: gå från PCR till kloner i bara tre steg och på så lite som 5 minuters praktisk tid
• Effektiv: få upp till 95 % kloner med korrekt infogning
• Beprövad: pålitlig prestanda i över ett decennium med över 4 000 citeringar

Kloning, PCR Kloning