Invitrogen™ TOPO™ TA Cloning™ Kit för subkloning, med en Shot™ TOP10 kemiskt kompetenta E. coli -celler

Kloningskit finns med en mängd olika kompetenta celler, eller utan kompetenta celler, beroende på dina behov och budget. Varje kit använder pCR™ 2.1-TOPO TA-vektor med lämpliga restriktionsställen för subkloning.

pCR 2.1-TOPO TA-vektor: enkelhet för kloning och subkloning
pCR 2.1-TOPO TA-vektor linjäriseras med 3'-tymidin (T) överhäng för direkt ligering avTaq polymerasförstärkta PCR-produkter (TA cloning™ ) och är“ aktiveras” med kovalent bundet Topoisomeras I. Det finns inget behov av att lägga till ligas och kloningen är klar på 5 minuter. EcoRI-ställen som flankerar PCR-produktinsättningsstället möjliggör enkel excision av inlägg eller använd valfri kombination av 15 bekväma restriktionsställen som flankerar din PCR-insättning för enkel, riktad subkloning.

pCR 2.1-TOPO TA klon urval och
manipulation pCR 2.1-TOPO TA-vektor innehåller både ampicillin- och kanamycinresistensmarkörer och Lac Z-genen förα blå/vit screening.

Förenklat TOPO -baserad kloning med
hjälp av TOPO kloningsteknologi, det finns inget behov av PCR-primrar som innehåller specifika sekvenser, post-PCR procedurer, vektorpreparering eller andra tidsintensiva DNA-manipulationssteg. Lägg bara till din PCR-reaktion direkt till den medföljande topoisomerasladdade vektorn, inkubera 5 minuter och transformera E. coli -kompetenta celler.

Effektiv kloning Med
upp till 95 % av klonerna som bär det önskade inlägget kan du screena färre kloner, vilket sparar tid och pengar. De pCR 2.1-TOPO TA-vektor som används i detta kit kommer med 3'-T överhäng för effektiv ligering avTaq polymerasförstärkta PCR-produkter, som innehåller 3'-A överhäng.

Standarden inom kloning
När det gäller kloning, TOPO™ kloningsteknik har varit en pålitlig partner för tusentals forskare i över tio år. Snabb, enkel att använda och effektiv, TOPO kloning har tillämpats på många olika vektorer för ett brett spektrum av tillämpningar.

TOPO TA Cloning Kit för subkloning: kit
alternativ Den TOPO TA Cloning Kit för sekvensering kan köpas med en mängd olika kompetenta celler som ger olika fördelar beroende på dina behov:

• Allmän kloning: TOP10 celler (kat.nr. K4500-01, K4500-40)
• Högeffektiv kloning: TOP10 Electrocomp™ Celler (kat.nr. K4560-01, K4560-40)
• Allmän kloning, bakteriofag T1-resistens: DH5α -T1R-celler (kat.nr. K4520-01, K4520-40)
• Snabb tillväxt: Mach1™ -T1R kemiskt kompetent E. Coli (kat. nr. K4510-20)
• Tillhandahåll din egen: för flexibilitet och för att spara pengar (kat.nr. 450641)

Två versioner av satsen som inkluderar en PureLink™ Quick Plasmid Miniprep Kit (kat. nr. K4500-02 och K4510-02) för användning i isolering av ren, sekvenseringsfärdig, rekombinant plasmid finns också tillgängliga.

• Snabbt och enkelt: gå från PCR till kloner i bara tre steg och på så lite som 5 minuters praktisk tid
• Effektiv: få upp till 95 % kloner med korrekt infogning
• Beprövad: pålitlig prestanda i över ett decennium med över 4 000 citeringar
• Enkelt: ingen ligas, post-PCR förfaranden eller PCR-primrar som innehåller specifika sekvenser krävs
• Vektor: pCR 2.1-TOPO TA vektor: subkloningsvektor med 15 bekväma restriktionsställen som flankerar ditt inlägg för enkel, riktad subkloning
• Kloningsmetod: TOPO TA Cloning : Topoisomeras I-baserad, 5-minuters ligering av PCR-produkter med 3 ft.-A överhäng (Taq polymeras amplifierat) till TOPO vektor med T överhäng
• Kompetenta celler: olika alternativ: välj från kit med antingen allmänna, högeffektiva, bakteriofag T1-resistenta, snabbväxande kompetenta celler, eller använd dina egna

Applikationer:
Kloning, PCR Kloning