Invitrogen™ Zero Blunt™ TOPO™ PCR Cloning Kit för sekvensering, med en Shot™ TOP10 Kemiskt kompetent E. coli

Varje kit använder pCR™4Blunt-TOPO vektor med specialdesignade sekvenseringsprimerställen som returnerar mer infogningssekvens och mindre vektorsekvens från varje reaktion. Kit innehåller allt som behövs för att klona och välja rekombinanta vektorer som innehåller ditt valda PCR-fragment.
pCR4Blunt-TOPO vektor : optimerad för sekvensering
Vi har tagit bort mycket av det multipla kloningsstället från pCR4Blunt-TOPO-vektorn för att förkorta avståndet mellan sekvenseringsprimerställena och insättningsstället till så lite som 33 bp. Detta innebär att sekvenseringsreaktioner ger mindre vektorsekvens och mer infogningssekvens. pCR4Blunt TOPO vektorn har platser för fyra vanliga sekvenseringsprimrar: M13 framåt, M13 bakåt, T7 och T3 . Satsen innehåller en alikvot av varje.
pCR4Blunt-TOPO klonselektion och manipulering
PCR4Blunt-TOPO-vektorn innehåller både ampicillin- och kanamycinresistensmarkörer och en LacZα -ccdB genfusion för positiv selektion och blå/vit screening. Vektorns minimerade multipla kloningsställe inkluderar fortfarande flankerande EcoRI-ställen för förenklad excision av klonade PCR-produkter och ett unikt Sse8387I-ställe för generering av kapslade deletioner före sekvensering. T7 och T3 promotorer är också närvarande för in vitro-transkription.
Förenklad, TOPO-baserad kloning
med hjälp av TOPO kloningsteknologi, det finns inget behov av PCR-primrar som innehåller specifika sekvenser, post-PCR procedurer, vektorpreparering eller andra tidsintensiva DNA-manipulationssteg. Lägg bara till din PCR-reaktion direkt till den medföljande topoisomerasladdade vektorn, inkubera 5 minuter och transformera de medföljande E. coli- kompetenta cellerna.
Effektiv kloning
Med upp till 95 % av klonerna som bär den önskade insatsen kan du screena färre kloner, vilket sparar tid och pengar. pCR4Blunt-TOPO-vektorn som används i detta kit kommer utan överhäng för effektiv ligering av PCR-produkter skapade genom korrekturläsning av termostabila polymeraser som lämnar PCR-produkter med trubbiga ändar.
Standarden inom kloning
När det gäller kloning, TOPO kloningsteknik har varit en pålitlig partner för tusentals forskare i över tio år. Snabb, enkel att använda och effektiv, TOPO kloning har tillämpats på många olika vektorer för ett brett spektrum av tillämpningar.
Zero Blunt TOPO PCR Cloning Kit för sekvensering: kit-format
The Zero Blunt; TOPO PCR Cloning Kit for Sequencing kan köpas med en mängd olika kompetenta celler som ger olika fördelar beroende på dina behov:

• Allmän kloning: TOP10 celler (kat. nr. K2875-J10, K2875-20, K2875-40)
• Högeffektiv kloning: TOP10 Electrocomp™ Celler (kat.nr. K2880-20, K2880-40)
• Allmän kloning, bakteriofag T1-resistens: DH5α -T1R (kat. nr. K2895-20)
• Snabb tillväxt: Mach1™ -T1 R kemiskt ^{kompetent E. Coli (kat. nr. K2835-20)}

Kromatinbiologi, kromatinimmunutfällning (ChIP), kloning, metyleringsanalys, PCR-kloning, RNAi, epigenetik och icke-kodande RNA-forskning, sekvensering av bisulfitbehandlat DNA