Invitrogen™ Zero Blunt™ TOPO™ PCR Cloning Kit för sekvensering, utan kompetenta celler

Använder pCR™4Blunt-TOPO™ vektor med specialdesignade sekvenseringsprimerställen som returnerar mer infogningssekvens och mindre vektorsekvens från varje reaktion. Inkludera de verktyg som krävs för att klona och välja rekombinanta vektorer som innehåller ditt valda PCR-fragment. Resistent mot Ampicillin (AmpR) och Kanamycin (KanR).
pCR4Blunt-TOPO vektor: Optimerad för
sekvensering pCR4Blunt-TOPO-vektorn har ett minimerat multipelkloningsställe och därmed ett kortare avstånd mellan sekvenseringsprimerställena och infogningsstället (så lite som 33 bp). Så sekvenseringsreaktioner producerar mindre vektorsekvens och mer infogningssekvens. pCR4Blunt TOPO vektorn har platser för fyra vanliga sekvenseringsprimrar: M13 framåt, M13 bakåt, T7 och T3 . Satsen innehåller en alikvot av varje.
pCR4Blunt-TOPO klonselektion och manipulation
PCR4Blunt-TOPO-vektorn innehåller både ampicillin- och kanamycinresistensmarkörer och en LacZα - ccd B-genfusion för positiv selektion och blå/vit screening. Vektorns minimerade multipla kloningsställe inkluderar fortfarande flankerande EcoRI -ställen för förenklad excision av klonade PCR-produkter och ett unikt Sse8387I-ställe för generering av kapslade deletioner före sekvensering. T7 och T3 promotorer är också närvarande för in vitro-transkription.
Förenklad TOPO-baserad kloning
TOPO kloningsteknologi, det finns inget behov av PCR-primrar som innehåller specifika sekvenser, post-PCR procedurer, vektorpreparering eller andra tidsintensiva DNA-manipulationssteg. Lägg bara till din PCR-reaktion direkt till den medföljande topoisomerasladdade vektorn, inkubera 5 minuter och transformera E. coli -kompetenta celler.
Effektiv kloning
Med upp till 95 % av klonerna som bär det önskade inlägget kan du screena färre kloner, vilket sparar tid och pengar. pCR4Blunt-TOPO-vektorn har inga överhäng för effektiv ligering av PCR-produkter skapade genom korrekturläsning av termostabila polymeraser som lämnar PCR-produkter med trubbiga ändar.
Det mest använda kloningssetet
När det gäller kloning, TOPO kloningsteknik har varit en pålitlig partner för tusentals forskare i över tio år. Snabb, enkel att använda och effektiv, TOPO kloning har tillämpats på många olika vektorer för ett brett spektrum av tillämpningar.
Kitalternativ: Zero Blunt TOPO PCR-kloningskit för sekvensering
Zero Blunt TOPO PCR-kloningskit för sekvensering kan köpas med en mängd olika kompetenta celler som ger olika fördelar beroende på dina behov:

• Allmän kloning: TOP10 celler (kat. nr. K2875-J10, K2875-20, K2875-40)
• Högeffektiv kloning: TOP10 Electrocomp™ celler (kat. nr. K2880-20, K2880-40)
• Allmän kloning, bakteriofag T1-resistens: DH5α -T1R (kat. nr. K2895-20)
• Snabb tillväxt: Mach1™ -T1R kemiskt kompetent E. coli (kat. nr. K2835-20)
• Tillhandahåll dina egna celler (kat. nr. 450159 och 450031)

• Snabbt och enkelt: gå från PCR till kloner i bara tre steg, inklusive en 5-minuters kloningsreaktion
• Effektiv: få upp till 95 % kloner med korrekt infogning
• Beprövad: möjliggör pålitlig prestanda i över ett decennium med över 20 000 citeringar
• Enkelt: ingen ligas, post-PCR förfaranden eller PCR-primrar som innehåller specifika sekvenser som krävs
• Exakt: för användning med high fidelity DNA-polymeraser, inget behov av A-överhäng på PCR-produkt
• Antibiotikaresistens: Ampicillin (AmpR), Kanamycin (KanR)

Kloning, PCR Kloning