Invitrogen™ LentiArray™ Human Ion Channel CRISPR Library

Den prisbelönta Invitrogen™ LentiArray™ Humant jonkanalbibliotek riktar sig mot 328 gener med upp till 4 gRNA per genmål (sammanslagna i en enda brunn) för totalt 1 312 gRNA. Biblioteken levereras som 100μ L av bruksfärdiga lentivirala partiklar per genmål med en genomsnittlig titer på 1x10 ⁸ TU/ml (funktionell titer bestäms av antibiotikaresistens).

Jonkanaler är integrerade membranproteiner som etablerar den elektrokemiska gradienten som ger upphov till både vilomembranpotentialen och bildandet av aktionspotentialer som är avgörande för nervledning och hjärt- och muskelkontraktion, samt andra processer som insulinfrisättning och aktivering av T-celler. Genmålen inom detta bibliotek valdes ut med hjälp av de mest uppdaterade genomdatabaserna, inklusive NCBI RefSeq-databasen, och korsrefererades till databasen Gene Ontology Consortium (GO) och/eller HUGO Gene Nomenclature Committee (HGNC).

Byggd för att ge dig framgång
LentiArray CRISPR-bibliotek är konstruerade med hjälp av gRNA-designer producerade med hjälp av Thermo Fisher ’Scientifics egenutvecklade CRISPR gRNA-designalgoritm. Denna algoritm innehåller den senaste gRNA-designforskningen, såväl som vår omfattande in-house erfarenhet, för att producera design av högsta kvalitet. gRNA-designerna som ingår i LentiArray CRISPR-bibliotek är utvalda för maximal redigeringseffektivitet och specificitet och är utformade för att slå ut alla kända isoformer av målgenen. För varje genmål ingår upp till fyra högkvalitativa gRNA:er för att säkerställa högeffektiv knockout av målgenen i ett brett spektrum av celltyper.

Designa och utför dina experiment utan begränsningar
LentiArray CRISPR-bibliotek är designade och konstruerade för att ge dig fullständig kontroll över din experimentella design. De använder en design med två vektorer, som uttrycker nukleaset Cas9 och gRNA från separata lentivirala konstruktioner, vilket gör att du kan diktera när och hur genomredigeringsverktygen levereras till dina celler.

De LentiArray Cas9 lentiviruskonstruktion uttrycker ett mänskligt, kodonoptimerat Cas9-nukleas med en blasticidinresistensgen under kontroll av EF-1α (EFS)-promotor. Du kan välja att saminfektera dina celler med båda LentiArray gRNA lentivirus och Cas9 lentivirus eller bara LentiArray Cas9 lentivirus för att etablera en stabil Cas9-uttryckande cellinje. Med LentiArray CRISPR-bibliotek har du friheten att designa det experimentella tillvägagångssätt som bäst passar ditt modellsystem och dina screeningmål.

Dessutom, för att minimera restriktioner för din experimentella design, gRNA lentivirus som utgör LentiArray CRISPR-bibliotek innehåller inte fluorescerande markörer. Detta gör att reportrar oavsett våglängd kan användas med biblioteken och utökar din förmåga att utföra multiplexerade experiment. För utmanande cellinjer, den LentiArray gRNA-lentivirus innehåller en puromycinresistensgen som möjliggör anrikning av populationen av redigerade celler och driver starkare fenotyper.

Optimera din analysdesign och ha fullt förtroende för dina resultat med LentiArray kontroller
Högkvalitetskontroller är hörnstenen i en framgångsrik skärm. De LentiArray CRISPR-bibliotekets produktlinje innehåller en uppsättning kontroller som hjälper dig att snabbt utveckla din analys och ge dig självförtroende när du definierar dina träffkriterier.