Thermo Scientific™ LightShift™ Kemiluminescerande EMSA-kit

Kitet innehåller reagenser för att ställa in och anpassa protein:DNA-bindningsreaktioner, en kontrolluppsättning av DNA och proteinextrakt för att testa kitsystemet, stabiliserat streptavidin-HRP-konjugat för att undersöka det biotinmärkta DNA-målet och en exceptionellt känslig kemiluminescerande substratmodul för detektion. Principen för LightShift™ EMSA-detektion liknar en Western blot. Biotin-ändmärkt duplex-DNA inkuberas med ett nukleärt extrakt eller renad faktor och underkastas elektrofores på en naturlig gel. DNA:t överförs sedan snabbt (30 minuter) till ett positivt nylonmembran, UV-tvärbundet, sonderas med streptavidin-HRP-konjugat och inkuberas med substratet. Protokollet från märkning till resultat kan utföras på en enda dag. Allt du behöver för att utföra analysen är renat DNA-mål som har slutmärkts med biotin, proteinextraktet du vill testa, nylonmembran och grundläggande elektroforesutrustning. DNA-mål kan syntetiseras med 5'- eller 3'-biotinmärkningar eller så kan de märkas efter syntes med Thermo Scientific Biotin 3'-ände DNA-märkningskit (delnr 89818). Nukleära, cytosoliska eller helcellsproteinextrakt kan erhållas genom en mängd olika metoder, inklusive Thermo Scientific NE-PER Nukleär och cytoplasmatisk extraktionsreagenssats (delnr. 78833).

Höjdpunkter:

• Inkluderar EBNA-kontrollsystem för att hjälpa nya användare att utveckla en fungerande analys och förstå de metoder som används för att bekräfta bindningsinteraktionsspecificitet
• Utmärkt för att upptäcka proteiner med låg förekomst i kärnextrakt
• Känslighet som överträffar radioaktiva och digoxigeninmetoder
• Kompatibel med tidigare etablerade bindningsförhållanden för populära DNA:proteininteraktioner