Invitrogen™ Kit med LEVANDE/DÖD™Bac Light™ bakteriell viabilitet

Kiten LEVANDE/DÖDBacLight bakteriell viabilitet använder blandningar av SYTO™ 9 grönfluorescerande nukleinsyrafärgning och den rödfluorescerande nukleinsyrafärgningen propidiumjodid. Dessa färgningar skiljer sig både i sina spektrala egenskaper och i sin förmåga att penetrera friska bakterieceller. När den används enskilt märker SYTO 9-färgningen i allmänhet alla bakterier i en population,— de med intakta membran och de med skadade membran. Propidiumjodid penetrerar däremot endast bakterier med skadade membran, vilket orsakar en minskning av SYTO 9-färgningsfluorescensen när båda färgämnena är närvarande.

Kiten LEVANDE/DÖD Bac Light bakterieviabilitet har testats grundligt med en mängd olika organismer och under flera olika förhållanden. Kiten är idealiska för fluorescensmikroskopi eftersom de levande (gröna fluorescerande) och döda (röda fluorescerande) cellerna kan visas separat. De är också lämpliga för kvantitativ analys med en fluorometer, fluorescensmikroplattläsare, flödescytometer eller annan instrumentering.

Traditionella metoder för att bedöma bakteriell viabilitet är beroende av metaboliska egenskaper eller membranintegritet. På grund av skillnader i morfologi, cytologi och fysiologi bland de många bakteriearterna har det dock varit utmanande att utveckla en universellt användbar viabilitetsanalys med direkträkning. Kiten LEVANDE/DÖD Bac Light bakterieviabilitet är baserade på membranintegritet vilket gör det möjligt för forskare att särskilja levande och döda bakterier enkelt, tillförlitligt och kvantitativt på några minuter, även i en blandad population med olika bakterietyper.

Kitet LEVANDE/DÖD Bac Light bakterieviabilitet finns i tre olika format:

Kitet LEVANDE/DÖD Bac Light bakterieviabilitet för mikroskopi (kat. nr. L7007) Kitet
LEVANDE/DÖD Bac Light bakterieviabilitet för mikroskopi innehåller två olika förblandade lösningar av SYTO 9 och propidiumjodid (PI) i 300μ L DMSO. De fluorescerande färgämnena blandas i olika proportioner i var och en: Komponent A– 1,67 mM SYTO 9& 1,67 mM PI, komponent B– 1,67 mM STYO 9& 18,3 mM PI. Detta kit är tillgängligt för kunder som redan har utvecklat protokoll med den förblandade färgämnesutformningen.

Kitet LEVANDE/DÖD Bac Light bakterieviabilitet för mikroskopi& kvantitativa analyser (kat.nr. L7012)
Kitet LEVANDE/DÖD Bac Light bakterieviabilitet för mikroskopi& kvantitativa analyser inkluderar två separata lösningar av SYTO 9- (3,34 mM) och propidiumjodid- (20 mM) färgämnen i 300μ L DMSO. De separata färgningskomponenterna möjliggör flexibilitet för optimering och underlättar kalibreringen av bakteriell fluorescens i kvantitativa procedurer.

Kitet LEVANDE/DÖD BacLight bakterieviabilitet (kat.nr. L13152)
För ytterligare smidighet innehåller kitet LEVANDE/DÖD BacLight bakterieviabilitet 10 par av de föruppmätta separata SYTO 9- och propidiumjodidfärgämnena i förseglade polyetenöverföringspipetter. Utöver den smidiga förpackningen i de förseglade pipetterna levereras de fluorescerande färgämnena torra, utan DMSO eller andra lösningsmedel. Denna utformning kräver inte kylning och förblir stabil vid temperaturer≤– 20°C efter rekonstituering.

Alla tre kit levereras med 10 ml BacLight monteringsolja för bakterier som är immobiliserade på membran. Brytningsindex vid 25°C är 1,517± 0,003.

Vilken fysiologisk buffert som helst mellan pH 7,0–8,0, inklusive PBS kan användas för att späda ut SYTO-färgämnena för färgningslösningen.

Vid rekommenderade reagensspädningar och volymer innehåller kiten L7007 och L7012 tillräckligt med material för att utföra≥ 1 000 individuella tester i 96-brunnars analysplattor, många fler tester med fluorescensmikroskopi eller ~200 tester med flödescytometri.

I kit L13152 innehåller varje applikatorpar tillräckligt med färgämne för att utföra 50 individuella tester i en 96-brunnars analysplatta, ~1 000 analyser med fluorescensmikroskopi eller 10 tester med flödescytometri.

Kiten LEVANDE/DÖD BacLight bakterieviabilitet har testats på följande bakteriearter: Bacillus cereus, B. subtilis, Clostridium perfringens, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Micrococcus luteus, Mycobacterium phlei, Pseudomonas aeruginosae, P,mon. Serratia marcescens, Shigella sonnei, Staphylococcus aureus och Streptococcus pyogenes. Alla dessa bakterietyper har visat en god korrelation mellan resultaten som erhållits med kiten LEVANDE/DÖD BacLight bakterieviabilitet och de som erhållits med standardplatträkningar.

Dessa tester utfördes på logaritmiskt växande kulturer av organismer. Dessutom har vi fått positiva rapporter från forskare som har använt dessa kit med: Agrobacterium tumefaciens, Edwardsiella ictaluri, Eurioplasma eurilytica, Lactobacillus sp., Mycoplasma hominus, Propionibacterium sp., Proteus mirabilis och Zymomonas sp.