Thermo Scientific™ Maxima™ H Minus cDNA Synthesis Master Mix

Mastermixen innehåller Maxima H Minus Reverse Transcriptase (RT) och RiboLock RNas-hämmare. Maxima H Minus RT är ett avancerat enzym som härrör från M-MuLV RT genom in vitro-evolution. Enzymet har hög termostabilitet, robusthet, processivitet, ökad cDNA-synteshastighet och brist på RNase H-aktivitet. Den rekombinanta RiboLock RNase Inhibitor skyddar effektivt RNA-mall från nedbrytning av RNas A, B och C vid temperaturer upp till 55 °C. Mastermixen innehåller också reaktionsbuffert, dNTP, oligo (dT) ₁₈ och slumpmässiga hexamerprimrar. Ett separat rör med No-RT-kontrollblandning tillhandahålls också för bekväm RT-negativ kontroll.

Båda kiten är kapabla till reproducerbar cDNA-syntes vid förhöjda temperaturer (50 C °65 –°C). Syntesreaktionen är typiskt fullbordad på 15-30 –minuter. Det inkluderade dubbelsträngade specifika DNaset i Maxima H Minus cDNA Synthesis Master Mix med dsDNase tillåter avlägsnande av genomiskt DNA från RNA-prover på två minuter utan att påverka kvaliteten eller kvantiteten av RNA. Detta dsDNase är också tillgängligt separat (kat.nr EN0771).

Funktioner av Maxima H Minus cDNA Synthesis Master Mix inkluderar:
• En-rörs mastermix hjälper till att minska pipetteringsstegen och förbättrad konsistens i RT-qPCR-resultat
• Ökad RT-effektivitet över ett brett spektrum av ingående RNA-mängder och genmål
• Hög termostabilitet för att tillåta RT-–reaktioner °vid 50 65 C temperaturområde
• Integrerat steg för avlägsnande av genomiskt DNA från RNA-prover (Maxima H Minus cDNA Synthesis Master Mix med endast dsDNase)

Ytterligare information om reaktionskomponenter
• No RT-kontrollblandningen innehåller alla komponenterna i Maxima H Minus cDNA Synthesis Master Mix förutom RT. Närvaron av en PCR-produkt i kontrollreaktionen utan RT indikerar att reaktionen är kontaminerad med DNA. För att ytterligare förbättra genomisk DNA-elimineringseffektivitet rekommenderas starkt inkubation av mall-RNA med dsDNas (kat. nr. EN0771).
• Nukleasfritt vatten tillhandahålls för reaktionsinställning och utspädning av prov-DNA. Frånvaron av exodeoxiribonukleaser, ribonukleaser och fosfataser har bekräftats genom lämpliga kvalitetstester.
• För att ytterligare förbättra genomisk DNA-elimineringseffektivitet rekommenderas starkt inkubation av mall-RNA med det inkluderade dsDNaset. (Maxima H Minus cDNA Synthesis Master Mix med endast dsDNase)
• dsDNaset används för snabbt och säkert avlägsnande av kontaminerande genomiskt DNA från RNA-prover. dsDNas inaktiveras lätt genom måttlig värmebehandling (55 °C). Det möjliggör ett dramatiskt förenklat arbetsflöde som kombinerar genomisk DNA-eliminering och cDNA-syntes i en-rörsprocedur. (Maxima H Minus cDNA Synthesis Master Mix med endast dsDNase)