Sartorius™ Microsart™ ATMP Mycoplasma

Snabb upptäckt av Mycoplasma-kontamination i Advanced Therapy Medicinal Products (ATMP) är mycket viktigt. Med Microsart™ ATMP Mycoplasma, testtiden kan minskas från veckor till bara tre timmar. Dessutom TaqMan™ sond tillför hög specificitet till PCR-systemet och minimerar resultattolkningen. De Microsart™ ATMP Mycoplasma har effektivt validerats enligt EP 2.6.7 i kombination med EP 2.6.21 med avseende på detektionsgränsen för alla listade Mycoplasma-arter, specificitet och robusthet för autologa celltransplantationer (t.ex. kondrocyter).

Effektiva tillämpningar Mycoplasma finns i de flesta cellodlingsanläggningar och vävnadsodlingslabb. Det uppskattas att Mycoplasma är ansvarigt för upp till 60 % av cellkulturkontaminationen. De Microsart™ ATMP Mycoplasma realtids-PCR-kit är speciellt utformat för sjukhus, institutioner och företag som är involverade i att testa Mycoplasma-kontamination enligt EP 2.6.7 i cellbaserad terapi. Den kan användas för att direkt detektera Mollicutes (Mycoplasma, Acholeplasma, Spiroplasma) i cellkulturer och cellkultur-härledda biologiska, ATMPs.

High Performance Mycoplasma detekteras explicit genom att amplifiera ett mycket konserverat rRNA-operon, eller mer exakt, en 16S rRNA-kodande region i mykoplasmanomet. Den mykoplasmaspecifika amplifieringen detekteras vid 520 nm (FAM™ kanal). Satsen innehåller en färdig att använda Mastermix som innehåller polymeras, primers och FAM™ - och ROX™ - Märkt prober, som möjliggör specifik detektion av mollikutarter och en intern kontroll. En detektionsgräns på mindre än 10 CFU/mL för alla Mycoplasma-arter som nämns i den europeiska farmakopén uppfyller dess krav på känslighet och specificitet och robusthet.

Förebyggande av kontaminering Satsen innehåller dUTP istället för dTTP, så det finns möjlighet att bryta ned amplikoner från tidigare analyser med uracil-DNA-glykosylas (UNG). Således kan förekomsten av falskt positiva resultat minimeras. UNG ingår inte i satsen. Den interna amplifieringskontrollen upptäcker falsknegativa resultat på grund av PCR-hämmare eller felaktig DNA-extraktion. Den interna kontroll-DNA:t kan läggas till direkt till PCR-mastermixen för att fungera som en PCR-kontroll eller övervaka extraktionsprocessen. Förstärkningen av den interna kontrollen detekteras vid 610 nm (ROX™ kanal). Med uracil-DNA-glykosylas (UNG), innehåller kitet dUTP istället för dTTP för att bryta ned amplikoner från tidigare analys genom att använda uracil-DNA-glykosylas (UNG). Detta minimerar förekomsten av falskt positiva resultat.