Invitrogen™ ATP Bestämningskit

Funktioner i ATP Determination Kit inkluderar:

• Använder ett luminescensbaserat system för att övervaka ljusutsläpp, vilket möjliggör känslig och exakt kvantifiering av nivåerna ATP
• Erbjuder exceptionell känslighet, kapabel att upptäcka så lite som 0,1 pikomol av redan existerande ATP eller ATP genererade i kinetiska system
• Använder en unik formulering där luciferas- och luciferinkomponenterna paketeras separat, vilket gör det möjligt för forskare att optimera analysförhållandena för sina specifika prover och instrument
• Inkluderar en generös tillgång på reagenser, tillräcklig för att utföra 200 ATP analyser med 500 μl provvolymer eller 1 000 ATP prover med 100 μl provvolymer (tillräckligt för tio 96-brunns plattassays)
• Underlättar kvantitativ analys av ATP nivåer i ett brett spektrum av biologiska och miljöprover samt experimentella system
• Utnyttjar den mycket specifika och känsliga bioluminescensreaktionen mellan luciferin och luciferas i närvaro av ATP, vilket ger en pålitlig och reproducerbar metod för ATP kvantifiering
• Kompatibel med olika luminometrar och mikroplattläsare med luminescensläge, vilket gör det till ett mångsidigt verktyg för ATP detektering i olika forskningsmiljöer

Principen för den ATP-beroende bioluminescenta reaktionen

ATP Determination Kit baseras på det absoluta kravet av luciferas för ATP att producera ljus. I närvaro av Mg²⁺ katalyserar luciferasenzymet reaktionen mellan luciferin, ATP,_{och O2} för att bilda oxyluciferin, AMP, CO₂, pyrofosfat och ljus med en emission på cirka 560 nm vid pH 7,8. Den luminescerande signalen som genereras är direkt proportionell mot mängden av ATP, vilket möjliggör mätning av ATP nivåer.

Mät ATP nivåer i lösnings- eller celllysater

Testreagenserna i ATP Determination Kit är inte genomsläppliga för levande och intakta celler, vilket gör detta test lämpligt för att mäta extracellulära ATP eller ATP från prover i lösning. För att mäta intracellulära ATP nivåer för cellhälsa eller livskraftstester krävs celllys för att frigöras ATP från cellerna. Lysbuffertalternativ som är kompatibla med luciferas-luciferin-reaktionen inkluderar Pierce Luciferase Cell Lysis Buffer (2X) (Kat. Nr. 16189) och 20X-celllysbuffertformuleringen som anges nedan. 20X-bufferten bör spädas ut 1:20 med vatten och användas omedelbart för celllys innan luciferasanalysen ATP körs.

20X lysbuffert:

• 200 mM Tri (pH 7,5)
• 2 M NaCl
• 20 mM EDTA
• 0.2% Triton X-100

Omfattande och mångsidig ATP testkit

ATP är en kritisk molekyl som finns i alla levande celler och är energikälla för olika biologiska processer, inklusive muskelkontraktion, nervimpulsförökning och biokemisk syntes. ATP Nivåerna mäts ofta för att fastställa cellens livskraft och metabolism, bedöma mitokondriers funktion och aktivitet samt upptäcka bakteriell och mikrobiell kontaminering. Detta luciferasbaserade ATP detektionskit erbjuder en mångsidig och känslig metod för att mäta ATP produktionen i olika enzymatiska reaktioner, inklusive ATPas och NADPH-oxidas, samt för att övervaka ATP frisättning från celler.

Luciferin-luciferas-luminescenstestet –kan användas för att upptäcka lågintensiv bakteriell kontaminering i biologiska prover såsom blod, mjölk och urin, tillsammans med miljöprover för testning av vatten, jord och slam. ATP Detektion har också använts för att studera effekterna av antibiotika på bakteriepopulationer, fastställa cellproliferation och cytotoxicitet i både bakteriella och däggdjursceller, samt skilja cytostatisk kontra cytocidal potential hos anticancerläkemedel på maligna celltillväxt.